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文檔簡介
1、目前,農藥已經是環(huán)境污染中最主要的成分之一。作為殺蟲劑和除草劑,有機磷農藥由于廣譜、高效、易降解、半衰期短等優(yōu)點,廣泛應用于農業(yè)、工業(yè)、醫(yī)藥等領域,取得了巨大的經濟效益,而與此同時產生的環(huán)境和食品污染等問題也日益嚴重。絕大多數有機磷農藥具有很強的毒性,尤其對人與動物的毒性作用很大。它們經過皮膚、呼吸以及腸胃吸收等途徑進入機體,容易導致嚴重的疾病。隨著經濟的高速發(fā)展和人們生活水平的提高,人們對生活的要求不再停留在解決溫飽問題的階段,而更注
2、重生活品質的提高,因此,有機磷農藥的污染問題已引起人們越來越多的關注。要預防和處理有機磷農藥引起的環(huán)境、食品污染和避免急性食物中毒事件,加強對有機磷農藥分析方法的研究以及準確、及時地檢測有機磷,具有非常重要的意義。近年來,有許多關于有機磷農藥殘留檢測方法的文獻報道。
有機磷農藥殘留常用的檢測方法主要包括:光譜法、色譜法以及質譜法等,此外,還有酶抑制法、免疫分析法及生物芯片技術等快速檢測方法。光譜法、色譜法和質譜法等傳統(tǒng)有機
3、磷檢測法都存在耗時長、成本高,難以滿足現場快速檢測的實際需要;免疫分析法雖然快速、靈敏度高、操作簡單,但抗體制備難度大、且只適于單一農藥殘留檢測;相對而言,酶抑制法則為有機磷農藥檢測提供了一種簡便、靈敏、快速、經濟的檢測手段,且酶抑制法無需大型昂貴儀器做支撐,適于大量樣品篩選及現場檢測。鑒于此,本論文著重利用酶抑制原理、采用分光光度法和電化學分析法研究農殘速測。具體研究內容及結果如下:
(1)摸索和研究了2,6-二甲基對苯
4、醌(2,6-DMBQ)作為一種新型酶光譜指示劑評估有機磷農藥殘留。
本論文檢測了一種新的可供選擇的光譜酶指示劑2,6-DMBQ,此方法重點基于樣品中膽堿酯酶水解硫代乙酰膽堿,而得到硫代膽堿,測定其生成速度,生成的硫醇再與2,6-DMBQ反應,通過測量257nm處吸收峰的降低而體現酶活性。本論文研究2,6-DMBQ自身穩(wěn)定性、pH影響以及酶反應體系中各組分濃度的影響,并優(yōu)化了各條件,該體系用于有機磷農藥殘留的測定,取得了滿意
5、的結果。有機磷農藥在0.01-100μg/mL范圍內,抑制率隨著對農藥濃度的增加而增加,1μg/mL甲基對硫磷抑制率達到30%,10μg/mL抑制率達到了58%,而100μg/mL甲基對硫磷抑制率幾乎達到了100%。實驗結果表明該方法對于以后發(fā)明一種電化學生物傳感器評估膽堿酯酶活性和有機磷農藥污染具有非常重要的指導意義,有著良好的發(fā)展前景。
(2)動物酶抑制法中離子液體作用機制的探討研究。
基于有機磷對ACh
6、E活性的抑制,研究了親水型離子液體1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽[BMIM][BF4]在有機磷農藥抑制膽堿酯酶活性中的影響。系列研究了殘余活力、[BMIM][BF4]與膽堿酯酶的作用機制、抑制效率、作用時間以及有機磷農藥檢測下限。結果表明:在5.1%[BMIM][BF4]]-緩沖液中,酶抑制率較純緩沖液體系中增加了3.1倍。[BMIM][BF4]的加入,降低了體系殘留活力,增加了農藥抑制。
(3)乙酰膽堿酯酶仿生結構的建
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