1、卵母細胞玻璃化冷凍保存對于珍稀和瀕危種質(zhì)資源保存、“卵子庫”的建立、胚胎生物技術(shù)的發(fā)展具有重要意義。本實驗以綿羊卵母細胞為研究模型,通過比較卵母細胞不同發(fā)育階段、卵丘細胞有無及冷凍前用紫杉醇及細胞松弛素B預(yù)處理對綿羊卵母細胞玻璃化冷凍保存效果的影響,并對解凍后卵母細胞進行體外受精、孤雌激活,結(jié)果表明:(1)體外成熟24h綿羊卵母細胞(MⅡ stage)與未成熟卵母細胞(GV stage)相比,玻璃化冷凍-解凍后FAD染色存活率為(70.

2、63％vs.58.51％)；體外受精卵裂率(38.42％vs.22.68％),囊胚率(5.89％vs.O)具有顯著性差異(P<0.05)。表明:成熟的綿羊卵母細胞更適宜冷凍保存。(2)卵丘細胞的有無對玻璃化冷凍MⅡ期卵母細胞解凍后存活率、卵裂率、囊胚率均無顯著性差異(P>0.05)。(3)采用濃度為0.5μmol／L紫杉醇預(yù)處理綿羊卵母細胞冷凍保存效果最佳,解凍后卵母細胞的存活率(82.38％)與其他三個實驗組相比有顯著差異性(P<0.

3、05)；體外受精卵裂率(51.17％)和桑囊胚率(20.30％)亦顯著高于其他實驗組(P<0.05),但低于對照組(69.42％,34.77％)(P<0.05)；0.5μmol／L紫杉醇處理組孤雌激活卵裂率(53.61％)和桑囊胚率(22.64％),顯著高于其他實驗組,但于對照組(73.40％,33.79)(P<0.05)。(4)7.5μg／mL的細胞松弛素B預(yù)處理綿羊卵母細胞冷凍。解凍后的存活率(64.50％vs.68.87％)無顯著