1、目的和意義：
　　 腎缺血再灌注損傷(Ischemia reperfusion injury，IRI)是造成急性腎功能衰竭的主要原因之一，常見于機體大量失血、腎部分切除、腎移植以及腎實質切開取石等過程中。盡快恢復缺血區(qū)的血供是促進腎缺血損傷修復的關鍵，積極探討腎缺血再灌注損傷后血管新生具有重要意義。國內外研究發(fā)現：HIF-VEGF信號通路和Notch信號通路對血管新生具有重要調控作用；D114為Notch配體之一，是一種重要的血

2、管新生調節(jié)因子；VEGF高表達時可以促進下游基因D114和Notch1的表達上調；腎缺血再灌注損傷后會發(fā)生代償性的血管新生。最新研究發(fā)現特異性的miR-210在組織缺血、缺氧后表達上調，通過調控其靶基因促進血管新生。我們推測：HIF-VEGF-Notch信號通路可能是腎缺血再灌注損傷后介導血管新生的主要信號調控通路；miR-210可能通過參與調控HIF-VEGF-Notch信號通路來促進血管新生。
　　 本研究通過制作小鼠腎缺血

3、再灌注損傷模型，觀察腎缺血組織中HIF-VEGF-Notch信號通路相關因子的表達變化，并探討其在腎缺血再灌注損傷后血管新生中的作用，以期為缺血性腎損傷的臨床治療提供新思路。
　　 研究內容和方法：
　　 1、通過夾閉Balb/c小鼠雙側腎蒂45min來建立急性腎損傷模型。于腎缺血再灌注(IR)后4h、1d、3d處死小鼠，留取腎組織和血清標本待檢。
　　 2、通過觀察血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)的變化和腎

4、組織病理改變來判斷急性腎損傷模型是否成功。
　　 3、采用實時定量RT-PCR法檢測miR-210、HIF-1αmRNA、VEGFmRNA、D114mRNA、Notch1mRNA、Hes1mRNA的表達變化，采用Western Blot方法檢測HIF-1α、Notch1、Hes1蛋白的表達變化。
　　 結果：
　　 1、急性腎損傷模型成功標志：肌酐(Cr)在IR后4h、1d組表達水平均明顯高于sham組(P<0.

5、05)，分別為40.2±3.5μmol/L、90.00±3.81μmol/L；尿素氮(BUN)在IR后4h、1d組表達水平均明顯高于sham組(P<0.05)，分別為16.88±1.31 mmol/L、38.86±5.11mmol/L；腎組織通過HE染色結果顯示病理改變明顯。
　　 2、腎缺血再灌注損傷后HIF-VEGF-Notch信號通路相關因子的表達變化：
　　 (1)實時定量RT-PCR結果顯示：miR-210在I

6、R4h、1d、3d組表達水平均明顯高于sham組(P<0.05)，分別為1.29±0.06倍、2.55±0.15倍、1.8±0.13倍；HIF-1αmRNA在IR4h、1d組表達水平均明顯高于sham組(P<0.05)，分別為4.57±0.52倍、3.15±0.46倍；VEGFmRNA在IR4h、1d、3d組表達水平均明顯高于sham組(P<0.05)，分別為4.33±0.22倍、3.35±0.22倍、2.51±0.20倍；D114mR

7、NA在IR4h、1d組表達水平均明顯高于sham組(P<0.05)，分別約為4.31±0.38倍、2.77±0.36倍；Notch1mRNA在IR4h、1d、3d組表達水平均明顯高于sham組(P<0.05)，分別為6.65±0.28倍、4.53±0.23倍、2.37±0.24倍；Hes1mRNA在IR4h、1d、3d組均明顯高于sham組(P<0.05)，分別為3.4±0.24倍、5.58±0.28倍、2.27+0.16倍。
　

8、　 (2)Western Blot結果顯示：HIF-1α蛋白在IR4h、1d、3d組表達水平均明顯高于sham組(P<0.05)，HIF-1α/β-actin灰度比值分別為1.54±0.08、3.08±0.23、1.69±0.08；Notch1蛋白在IR4h、1d、3d組表達水平均明顯高于sham組(P<0.05)，Notch1/β-actin灰度比值分別為0.81±0.05、1.07±0.05、0.75±0.07；Hes1蛋白在IR

9、4h、1d、3d組表達水平均明顯高于sham組(P<0.05)，Hes1/β-actin灰度比值分別為0.74±0.06、0.91±0.07、1.09±0.07。
　　 結論：
　　 實驗結果表明，腎缺血再灌注損傷后miR-210、HIF-1α、VEGF、D114、Notch1、Hes1的表達變化發(fā)生顯著上調。研究結果提示，腎缺血再灌注損傷后miR-210可能通過調控HIF-VEGF-Notch信號通路來參與血管新生的調