1、胃癌相關基因與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關，是胃癌預測的重要標志，并且在胃癌不同的病理分期、病理分型及原發(fā)部位具有不同的基因表達特點及規(guī)律。三葉因子具有組織表達特異性，并且在消化道慢性炎癥及腫瘤發(fā)生發(fā)展等方面具有重要的生物學功能。TFF1具有黏膜保護和修復作用，但是近來的研究表明，TFF1與胃腸道的惡性腫瘤具有密切的關系，在癌灶組織中存在TFF1的表達降低，而在癌旁組織與炎癥部位呈高表達。microRNA家族已是基因表達調控網(wǎng)絡中關鍵的一員，

2、同時它們影響著多條信號傳導通路。許多microRNA與胃癌密切相關，可以通過抑制癌基因的表達或負性調節(jié)抑癌基因從而影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展，并且還可以直接以甲基化酶為靶蛋白通過影響甲基化水平參與下游基因的表達調控。新近研究表明三葉因子在正常組織與胃癌組織中差異表達，具有胃癌診斷的重要意義，是潛在的新型腫瘤標志物。我們推測microRNA可以通過調控TFF1表達而參與胃癌發(fā)生發(fā)展調控。本課題擬檢測microRNA對TFF1表達的調控作用，并進一

3、步闡明TFF1因子在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用，確定以TFF1為靶點的microRNA寡核苷酸鏈為胃癌治療的新型藥物。
　　 本課題研究中，我們首先對調控TFF1表達的microRNA進行篩選，我們應用MiRWalk軟件及生物信息平臺有microRNA.org-Targets and Expression、TargetScan和PicTar，預測了分別結合在TFF1的5'UTR、3'UTR及CDS區(qū)域的microRNA信息。我們挑選了

4、可能結合在TFF1的3'UTR區(qū)域的miRNA-423-5p，應用熒光定量PCR檢測它們在腫瘤組織和正常組織中的差異性表達，并檢測其對TFF1的mRNA表達影響。本課題我們重點研究miRNA-423-5p對TFF1的表達調控作用，我們構建含TFF1的3'UTR區(qū)域的報告基因質粒，應用熒光素酶活性實驗檢測證實TFF1是miRNA-423-5p調控的靶基因，miRNA-423-5p負調控其基因表達。進一步研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-423-5p通