1、V i s u d y n e 光動(dòng)力療法預(yù)防晶狀體后囊膜混濁的實(shí)驗(yàn)研究T h e E f f e c t o fP h o t o d y n a m i cT h e r a p yw i t hV i s u d y n eo n t h e P r e v e n t i o no fP o s t e r i o rC a p s u l e0 p a c i f i c a t i o n復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院博士研究生

2、： 黎蕾專 業(yè)： 眼科學(xué)導(dǎo) 師： 王文吉教授導(dǎo)師組成員： 陸國(guó)生教授錢江教授＼V i s u d y n e 光動(dòng)力療法預(yù)防晶狀體后囊膜混濁的實(shí)驗(yàn)研究摘要目的 觀察V i s u d y n e 光動(dòng)力療法( P D n 對(duì)離體培養(yǎng)的兔品狀體上皮細(xì)胞( R L E C s ) 和人晶狀體上皮細(xì)胞系( H L E C s ) 的殺傷作川．確定殺傷L E C s 的最佳P D T 參數(shù)，探討P D T 在體外殺傷L E C s 的作用機(jī)理．

3、評(píng)價(jià)P D T 在兔眼術(shù)中麻月j 抑制后囊膜餛濁( P C O ) 的有效性和安全性。方法 ( 一) R L E C s 原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)，H L E C s 系傳代培養(yǎng)．透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。M T T 法測(cè)定單純激光、不同濃度光敏劑和P D T 對(duì)R L E C s 和H L E C s 的殺傷怍用，井篩選最佳P D T 參數(shù)。( 二) 流式細(xì)胞儀P I 染色法分析P D T 對(duì)H L E C s 細(xì)胞周期的影響，A n n

4、e x i nV - F I T C ／P I 雙染法榆測(cè)細(xì)胞凋亡率，透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化。( 三) 兔眼晶狀體超聲乳化摘除后囊袋內(nèi)注入含有V i s u d y n e 的透明質(zhì)酸鈉．并行激光照射。術(shù)后6 周和1 2 周對(duì)P C O 評(píng)估通過(guò)臨床觀察( 分別對(duì)纖維化型P C O 和再生型P C O 進(jìn)鉬升級(jí)) ，照相、光鏡組織學(xué)檢查，同時(shí)測(cè)量中央后囊膜厚度，電鏡觀察捕膜和虹膜超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果 ( - - ) 在體外成功培養(yǎng)兔R

5、L E c s 。M T T 檢測(cè)結(jié)果顯示：?jiǎn)渭兗す鈱?duì)R L E c s和H L E C s ) ] 己殺傷作用。單純光敏劑組：V i s u d y n e 濃度( o1 2 5 p g ／m l ，對(duì)細(xì)胞沒(méi)有殺傷作用，，01 2 5 9 9 ／m 1 ．殺傷率呈濃度依賴性，P D T 組細(xì)胞殺傷：# 呈定的濃度依賴性。( 二) V i s u d y n e 光動(dòng)力療法作川十H L E C s 后，細(xì)胞閣期分析顯示G 2 期細(xì)胞數(shù)增

6、多，而S 期細(xì)胞數(shù)減少。P D T 后1 2 h 、2 4 h { 4 1 4 8 h 細(xì)胞凋亡率分別為7 71 7 i 25 5 ％、9 31 3 ±I 1 4 ％{ 1 1 9 74 7 ：：09 0 ％?？圩倦婄R觀察見(jiàn)：激光光斑未照射部位為J I 二常H I ，E C s ，激光光斑照射部位細(xì)胞呈捌亡表現(xiàn)。( i ) 術(shù)后6 周和1 2 N ．P D T 治療組和對(duì)照組比較：P C O 櫸度明硅輕．術(shù)后6 N ：纖維化掣

7、P c o 和再生型P C O 分級(jí)兩組之間有統(tǒng)汁學(xué)輥著性差異( P < 0 0 0 ¨，術(shù)后1 2 N ：阿紐之問(wèn)比較：纖維化! 口p c o 分級(jí)有統(tǒng)¨學(xué)硅蔣性差異( P - - 0 0 3 0 6 ) ．再，E 型P C O 分級(jí)無(wú)統(tǒng)¨學(xué)娃并性節(jié)異( P - 01 8 8 8 ) 。S o e m m e r i n g f l , 彤成情I 兌P D T 治療紐l ?^ 較對(duì)照組輕。P D T