1、糖尿病腎病(Diabetic nephropathy，DN)是糖尿病(Diabetes mellitus，DM)慢性微血管并發(fā)癥之一，是導致終末期腎衰竭的主要原因，嚴重影響了患者的生活質量和危害患者的生命健康。DN的發(fā)病機制非常復雜，尚未完全清楚，目前認為是多種復雜的因素，如糖代謝異常、腎臟血流動力學、蛋白質非酶糖基化、氧化應激、多元醇通路激活、遺傳易感基因等綜合作用的結果。近年來，醛糖還原酶在糖尿病慢性并發(fā)癥包括DN的發(fā)生所起的作用日

2、益受到關注。醛糖還原酶(AR)是多元醇通路中重要的限速酶，持續(xù)高血糖刺激下，醛糖還原酶被激活，通過活化多元醇通路，啟動了一系列過程如高滲應激，葡萄糖及脂質的氧化應激，蛋白的非酶糖基化等單獨或協(xié)同作用損傷腎臟微血管內皮細胞、。腎小球和腎小管細胞，引起細胞外基質增加，系膜擴張，腎臟肥大，從而導致糖尿病腎病的發(fā)生。p38MAPK是高糖致糖尿病腎病發(fā)病的重要的信號傳遞分子，p38MAPK信號通路是細胞信號傳遞的交匯點或共同通路。目前研究認為，細

3、胞內高糖刺激下，多元醇通路激活后可以通過二酯酰甘油(DAG)-PKC通路、氧化應激、蛋白質非酶糖基化等環(huán)節(jié)最終導致p38MAPK通路的激活，進而磷酸化轉錄因子，調節(jié)與細胞生長、增殖、分化和細胞外基質蛋白相關基因的表達，促進或加重糖尿病慢性并發(fā)癥的病變過程。 黃連素(berberine，[C<,20>H<,18>NO<,4>]<'+>，又稱小檗堿)是從小檗屬植物黃連(Coptidis Rhizoma，CR)、黃柏(Cortex P

4、hellodendri)根莖中提取出的一種異喹啉類生物堿。既往大量研究證實：黃連素具有降血糖、降血脂、降血壓，抑制醛糖還原酶、抗氧化等藥理活性，這些研究顯示了黃連素作為防治糖尿病并發(fā)癥用藥具有一定的臨床價值和應用前景。近年來有研究發(fā)現(xiàn)：黃連素可以明顯改善2型糖尿病大鼠的腎臟損害，保護。腎功能，延緩糖尿病腎臟病變的發(fā)生和發(fā)展。目前，尚未見到從影響醛糖還原酶/p38 MARK信號通路研究黃連素抗糖尿病腎病的作用機制的研究報道。因此，在前人研

5、究基礎上，本課題通過體內、體外實驗觀察黃連素對糖尿病腎損傷大鼠腎功能的保護作用，對高糖培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細胞細胞增殖與膠原合成的影響，從醛糖還原酶/p38 MARK信號轉導通路方面探討黃連素抗糖尿病腎病可能的作用機制。 第一章黃連素對糖尿病腎損傷大鼠腎功能保護作用及醛糖還原酶的影響(體內實驗)研究目的1、觀察黃連素對鏈脲佐菌素(STZ)誘導的糖尿病腎損傷大鼠腎功能的保護作用2、觀察黃連素對鏈脲佐菌素(STZ)誘導的糖尿病腎損傷

6、大鼠氧化應激、腎臟醛糖還原酶活性及其mRNA和蛋白表達的影響研究方法1、模型復制、分組、給藥：35只Wistar大鼠，體重為250+20g，禁食6小時后，單次腹腔注射50mg/kg鏈脲佐菌素(STZ，以枸椽酸鈉溶液稀釋，PH4.0，冰盒中新鮮配制)復制糖尿病大鼠模型。注射72h后測血糖，以禁食6h血糖≥16.7mmol/L，者，為糖尿病模型大鼠。選取糖尿病模型大鼠20只，隨機分為模型組、黃連素組，每組各10只。選同批次10只正常大鼠做為

7、正常對照組。糖尿病模型復制成功后次日，黃連素組大鼠給予0.5％醋酸纖維素鈉溶液制成的黃連素混懸液，灌胃，劑量為0.2g/kg。模型組和正常對照組給予等體積的0.5％醋酸纖維素鈉溶液。每日給藥時間8-9am，每周給藥6天，共觀察12周。實驗期間大鼠自由進食、飲水，不使用胰島素等降糖藥物。 的臨床價值和應用前景。近年來有研究發(fā)現(xiàn)：黃連素可以明顯改善2型糖尿病大鼠的腎臟損害，保護腎功能，延緩糖尿病腎臟病變的發(fā)生和發(fā)展。目前，尚未見到從