1、 本研究嘗試通過胚胎干細胞的體外培養(yǎng)，熟悉研究胚胎干細胞的技術(shù)路線，對分離出的胚胎干細胞進行體外分化抑制培養(yǎng)并對其加以鑒定；初步掌握人胚胎干細胞分離、建系的技術(shù)和方法，探索有效誘導(dǎo)人胚胎生殖細胞為神經(jīng)細胞的途徑，為相關(guān)基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。 方法：1.分別以昆明小鼠和人流產(chǎn)胚胎生殖嵴為材料分離內(nèi)細胞團和原始生殖細胞，進行擴增培養(yǎng)及凍存復(fù)蘇，觀察其生物學(xué)特性；分析了胰蛋自酶和絲裂霉素C的濃度和作用時間對ICM和PGC離散

2、效果的影響。2.采用免疫組織化學(xué)SABC法檢測培養(yǎng)細胞的胚胎階段特異性抗原SSEA-1、SSEA-4和堿性磷酸酶的表達；對體外分離培養(yǎng)的hEGCs進行了染色體核型分析和體內(nèi)分化實驗。3.比較了小鼠和人胎兒成纖維細胞飼養(yǎng)層分離、培養(yǎng)人原始生殖細胞的效果。4.以維甲酸(RA)為誘導(dǎo)劑，對傳代培養(yǎng)的人胚胎生殖細胞(hEGCs)進行分化誘導(dǎo)，使用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測誘導(dǎo)后的細胞NESTIN、NSE、NF-200和GFAP的表達。 研究表