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文檔簡介
1、木質纖維是自然界最豐富的可再生資源,約占整個植物細胞干重的90%左右。一般來說,木質纖維素中含纖維素45%、半纖維素25%和木質素30%。利用纖維素酶的催化作用,可以將纖維素組分降解為還原糖形式應用于乙醇發(fā)酵等領域,并且不會對環(huán)境造成污染和產生能量消耗。就目前國內外研究現(xiàn)狀,纖維素酶活力不高是限制木質纖維資源利用的主要因素之一,高產纖維素酶菌種的選育成為關鍵。
利用羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)法、剛果紅染色法、濾紙崩解法和胞外纖維素
2、酶活性測定法,從湖北神農架保護區(qū)不同區(qū)域采集的森林腐質土壤中分離篩選得到一株纖維素酶高產菌B-5。結合菌落形態(tài)觀察、顯微鏡觀察和ITS序列同源性分析,確定該菌株為鐮刀菌屬(Fusariumsp),與木賊鐮刀菌(FusariumEquiseti)相似度達99%。
濾紙崩解實驗顯示該菌72h對濾紙具有明顯崩解能力,失重率達37.9%。以羧甲基纖維素鈉為碳源,蛋白胨為氮源,28℃,180r/min,培養(yǎng)4d,其初始酶活為FPA酶
3、活(FPase)2.09IU/mL,CMC酶活(CMCase)5.20IU/mL。通過產酶條件優(yōu)化,確定稻草秸稈粉為唯一碳源,250mL的三角瓶中裝發(fā)酵液80mL,培養(yǎng)基初始pH為6.1,氮源添加量為1.0%,碳源添加量為2.5%,鼠李糖脂加量為0.1%,在溫度為28℃,搖床轉速為180r/min的條件下培養(yǎng)120h,最終B-5菌FPA酶活達到2.504IU/mL。
研究得到鐮刀菌B-5所產纖維素酶酶促反應的較適條件:40
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