1、雌激素在體內的生理作用通過雌激素受體(EstrogenReceptor，ER)ERβ和ERα的介導來實現(xiàn)調控。雌激素受體在細胞核和細胞質中均有分布。研究表明ERa能刺激細胞分裂和生長，ERβ能拮抗ERα的活性。ERβ在乳腺癌、前列腺癌、結腸癌、和卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展過程中具有調控作用。文獻報道m(xù)RNA的3’非翻譯區(qū)（3'UTR）序列異常容易導致癌癥的發(fā)生。mRNA的3'UTR有許多調控元件能調控mRNA的翻譯，mRNA的穩(wěn)定性及在細胞中的

2、定位。這些調控元件能與蛋白質或蛋白質復合物結合。mRNA3’UTR通過RNA結合蛋白和microRNA來實現(xiàn)其對基因表達的調控。我們以ERβmRNA3'UTR為研究對象，探索真核生物mRNA非翻譯區(qū)的調控機制。本實驗前期通過RNA沉降技術得到兩種與ERpmRNA3'UTR特異性結合的蛋白:Vigilin和ILF3。Vigilin是一個高度保守的，含有14個RNA結合結構域（KH結構域）的蛋白。ILF3是RNA結合蛋白中的一員，能與富含A

3、U序列的mRNA結合，調控基因表達。Vigilin和ILF3蛋白都參與基因調控，如RNA轉錄、RNA剪切、RNA編輯、RNA出核轉運等。研究Vigilin、ILF3和ERβ的調控關系對了解ERβmRNA3'UTR在雌激素信號傳導途徑的作用機制有重要的意義。
　　 本實驗通過凝膠阻滯實驗(EMSA)和Dual-Iuciferase實驗證明了Vigilin和ILF3能特異的結合于ERpmRNA3'UTR。雌激素受體可介導雌激素實現(xiàn)其

4、功能，Vigilin和ILF3蛋白可能通過與ERβ結合，參與雌激素信號通路的調控。為探討他們與雌激素受體的關系以及調控機制，我們構建Vigilin過表達和低表達的細胞穩(wěn)定株，ILF3過表達的細胞株穩(wěn)定株，通過WestemBlot檢測ERβ蛋白的表達情況。在蛋白水平上，ERβ蛋白的表達量隨著Vigilin蛋白量的升高而降低，當Vigilin表達被抑制時，ERβ的表達量升高。Vigilin蛋白對ERβ基因的表達起負調控作用，對Erα基因的表