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文檔簡介
1、條斑紫菜(Porphyra yezoensis)具有很高的營養(yǎng)價值和藥用價值,大量資料已表明紫菜多糖具有調節(jié)免疫、抗腫瘤、抗凝血、降血脂、抗氧化等多種生物學活性。本論文主要應用生化技術對條斑紫菜多糖進行了分離純化,從中獲得一種條斑紫菜多糖純品PY-G1,并對其一級結構進行檢測分析,同時對提取純化的條斑紫菜多糖進行了抗疲勞生物活性研究。 條斑紫菜多糖分離純化。采用熱水法制備條斑紫菜多糖提取液,經Sevag法脫蛋白和95%乙醇沉淀,
2、最后冷凍干燥得到條斑紫菜粗多糖。條斑紫菜粗多糖經DEAE-52柱層析純化獲得2個具有不同電荷性質的多糖組分PY-D1和PY-D2,用高效液相法測定其分子量分布后,選用合適分子篩凝膠柱層析Sepharose CL-6B純化,最后獲得2個條斑紫菜多糖產品PY-G1和PY-G2,均為首次從該藻類中分離得到。高效液相法、旋光度法、紫外光度法檢測結果表明PY-G1為均一多糖。 條斑紫菜多糖純品PY-G1結構分析。采用了高碘酸氧化法、還原水
3、解法、明膠比濁法、甲基化分析法、脫硫酸基分析等化學方法和高效液相法(HPLC)、氣相色譜(GC)分析、質譜(MS)分析、紅外光譜測定、NMR光譜分析等光譜學方法,對條斑紫菜多糖成分PY-G1進行了純度及結構鑒定。結果表明:條斑紫菜多糖PY-G1樣品分子量為246kDa,硫酸基百分含量為9%,為半乳聚糖,多糖鏈中存在1,3和1,4交替相連的重復單元,部分1,4連接的半乳糖殘基6位上含有硫酸基,另一部分1,4連接的半乳糖殘基3位和6位上含有
4、內醚環(huán)。由還原水解法得到PY-G1主要由一種單糖,即半乳糖(92%)組成的,但另外含有具有取代基的3,6-內醚半乳糖(3%)和6-甲基半乳糖(5%)。由高碘酸氧化結果計算得平均每mol單糖殘基消耗的高碘酸納量為0.51mol,說明多糖的骨架主要是以1→3位連接的半乳糖,或1→4位連接的3,6-內醚-半乳糖組成,其摩爾比約為1:1。根據已有文獻對PY-G1的紅外圖譜、13C-NMR、1H-NMR、GC-MS數據進行了歸屬。根據以上結果可推
5、斷:PY-G1主要由含硫酸基的前體[(1→3)-β-D-半乳糖-(1→4)-6-OSO3-α-L-半乳糖]組成,同時還存在瓊膠二糖[(1→3)-β-D-半乳糖-(1→4)-3,6-內醚-2-OCH3-α-L-半乳糖]及[(1→3)-β-D-半乳糖-(1→4)-α-L-半乳糖]的重復單元,其比例約為9:9:1。此外1,4連接的半乳糖殘基的2位和1,3連接的半乳糖殘基6位上尚含有天然的甲氧基。 條斑紫菜多糖抗疲勞生物學活性研究。應用
6、活體動物實驗技術,通過紫菜多糖不同劑量(0,0.75 positive control,0.125,0.25,2.5,25mg/kg/d)對小鼠游泳時間、乳酸脫氫酶活性、肌糖原和肝糖原含量等指標的檢測,分析了紫菜多糖提高小鼠抗疲勞生物活性功能及其量效關系。實驗結果表明,紫菜多糖可顯著延長小鼠游泳時間,最高可以提高37%;并且可以使小鼠在游泳前后乳酸脫氫酶含量分別增加53.5%和42.5%(P<0.05);增加小鼠肌糖原儲備量和肝糖原儲備
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