Il-6基因的表達及其多態(tài)性與變應性鼻炎的相關性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  目前已有多個研究發(fā)現(xiàn),白介素6(IL-6)基因多態(tài)性是多種免疫相關疾病的易感基因。最近的研究顯示,在過敏性呼吸系統(tǒng)疾病中,IL-6擔當重要角色。有關數(shù)據(jù)顯示,IL-6的表達同變應性鼻炎的發(fā)病之間存在一定的關系,本研究通過三部分實驗來探討IL-6基因多態(tài)性與中國漢族人群變應性鼻炎易感性之間是否相關性。
  方法:
  (1)采用HE染色和免疫組織化學法分別檢測45例變應性鼻炎患者下鼻甲組織、15例鼻中隔偏曲患

2、者下鼻甲組織(對照組)的病理組織學變化以及IL-6的表達。
  (2)收集265例變應性鼻炎患者的外周靜脈血及265例對照組的外周靜脈血樣本,對兩組樣本進行病例對照研究。提取血液樣本中的DNA,并對DNA樣本中IL-6基因的兩個多態(tài)位點(rs1800795和rs1800796)進行基因分型,探討IL-6的基因多態(tài)性與變應性鼻炎易感性的關系。基因分型采取PCR-RFLP和直接測序的法。
  (3)利用Balb/c小鼠建立卵清蛋

3、白致敏的變應性小鼠模型,按末次激發(fā)后處死時間分為6組(30min、1h、2h、6h、12h、24h),同時使用生理鹽水作為對照組,每組各5只小鼠。取各組小鼠鼻黏膜組織,利用HE染色法檢測各組小鼠鼻黏膜組織的病理組織學變化情況,western blot法檢測IL-6在各組小鼠鼻黏膜組織中的表達情況。
  結果:
  (1)HE染色結果表明,變應性鼻炎患者的鼻黏膜上皮組織發(fā)生部分脫落,視野下能夠見到杯狀細胞增生,組織存在水腫現(xiàn)象

4、,腺體增生,血管擴張,在上皮組織間可見到醫(yī)以嗜酸性粒細胞和淋巴細胞為主的大量炎細胞浸潤,其中還包括嗜堿性粒細胞、中性粒細胞等。對兩組組織切片中嗜酸性細胞進行計數(shù),結果表明變應性鼻炎組嗜酸性粒細胞浸潤顯著,為(31.92±2.95),正常對照組為(3.83±2.03),變應性鼻炎組明顯高于正常對照組,兩者相比差異顯著(P=0.001<0.05); western blot檢測結果表明,IL-6蛋白在變應性鼻炎患者鼻黏膜組織中的相對表達量為

5、(0.40±0.16),而在正常對照組下鼻甲組織中的相對表達量為(0.26±0.14),變應性鼻炎組明顯高于正常對照組(P=0.003<0.05)。
  (2)對IL-6基因多態(tài)性進行分析,結果表明IL-6 rs1800795等位基因頻率在變應性鼻炎患者與對照組中存在顯著差異(x2=4.52,P=0.03);多因素logistic回歸分析表明,相較于G等位基因,IL-6 rs1800795的C等位基因具有更高的變應性鼻炎發(fā)病風險,

6、OR值為1.31(1.01~1.68)。
  (3)動物行為學觀察結果表明,變應性鼻炎小鼠模型造模成功;HE染色結果表明,各變應性鼻炎模型組小鼠的鼻腔黏膜上皮均出現(xiàn)不同程度的結構紊亂,同時還可見充血、水腫以及黏膜層增厚等現(xiàn)象,此外還伴有黏膜上皮組織壞死以及脫落等,纖毛上皮可見有融合現(xiàn)象出現(xiàn),細胞核發(fā)生形變,形狀不規(guī)則,柱狀細胞以及杯狀細胞增生,血管擴張并增生,大量肥大細胞、中性粒細胞以及嗜酸性粒細胞、淋巴細胞浸潤。Western

7、blot檢測結果表明,各組小鼠鼻黏膜組織中均有IL-6蛋白的表達,其中在30 min組中的相對表達量為0.142±0.064,在1h組中的相對表達量為0.214±0.104,在2h組中相對表達量為0.274±0.092,在6h組中的相對表達量為0.324±0.122,然后隨著時間的延長呈逐漸下降趨勢,在12h組中的相對表達量為0.236±0.059,在24h組中的表達量為0.172±0.058。與對照組的相對表達量0.068±0.020

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