1、有效的分子標志物或者組合是輔助腫瘤臨床分型、指導精確診斷和治療以及預防的重要手段之一。本研究利用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳技術和免疫組織化學技術對可能在食管鱗癌發(fā)生發(fā)展過程中存在的雜合性丟失和異常的蛋白改變進行檢測，并將已測序數(shù)據(jù)納入進行聯(lián)合分析，旨在鑒定可能用于食管鱗癌預后判斷、早期檢測的標志物及組合。
　　選擇文獻報道和本課題組前期研究中發(fā)現(xiàn)的總共50個微衛(wèi)星雜合性丟失位點、6個高表達蛋白、以及22個高頻突變基因作為候選分子標志，

2、在食管鱗癌及其配對的手術切緣形態(tài)學正常的組織中進行初步分析，鑒定出6個雜合性丟失較高的微衛(wèi)星位點和3個在食管鱗癌組織中顯著高表達、而在手術切緣組織中不表達或表達極低的候選蛋白。在微衛(wèi)星標志中，D3S2423的雜合度最高，為87.5％;D13S171的雜合度最低，為58.0％。LOH頻率最高者為D3S1768(48.9％)，最低為D3S2452(28.8％)。P53、COX2、ANO1等在手術切緣正常組織中的陽性率分別為1.5％(1/69

3、)、1.3％(1/75)、0％(1/64)，而在腫瘤中的陽性率分別為54.0％(54/100)、30.8％(32/104)、25.0％(26/104)。對基因突變的分析結果顯示，突變頻率較高的為TP53突變39.3％(44/112)、TTN突變41.1％(46/112)、MUC16突變17.0％(19/112)等。將全部標志物進行組合分析，發(fā)現(xiàn)D3S1768、D13S171、D13S1493的LOH、TTN突變、以及P53蛋白高表達五標

4、志物組合時，其中任意兩個同時出現(xiàn)陽性的頻率為82.9％;D3S1768、D13S171、D13S1493的LOH、TP53突變及TTN突變五標志物組合中任意兩個在早期癌(Ⅰ/Ⅱa)病例中同時為陽性的頻率為63.3％，高于任何單一標志的畸變頻率，有可能成為食管鱗癌早期診斷的標志物組合。
　　Kaplan-Meier總生存分析結果顯示，PBRM1(P=0.016)、SYNE2(P=0.157)基因突變和COX2(P=0.079)蛋白高

5、表達的患者的術后生存期相對較短。多因素Cox回歸模型分析發(fā)現(xiàn)，PBRM1突變(P=0.012)、COX2高表達(P=0.044)與淋巴結轉移(P=0.006)為食管癌患者術后的獨立預后因素。PBRM1突變/SYNE2突變/pN（有淋巴結轉移）三標志物組合中至少兩個指標為陽性的食管鱗癌患者的總生存期顯著短于僅有一個指標陽性或均為陰性的患者(P=0.014)。提示其可能作為食管鱗癌預后判斷的標志物組合。
　　本研究表明，食管鱗癌中存在