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簡介：企業(yè)員工是指各類企業(yè)中憑借體力和腦力勞動來獲取工資收入并將其作為主要收入來源的人。拖延是指個體在執(zhí)行應當完成的任務或作出決策時的一種自愿的非理性的延遲傾向或回避行為。企業(yè)員工的拖延行為不但會使其產(chǎn)生焦慮情緒，降低工作效率，更不利于企業(yè)的發(fā)展。元認知是所有涉及認知活動的心理過程中的自我覺知、評價和調(diào)節(jié)，包括元認知知識、元認知體驗和元認知監(jiān)控三個要素。本研究旨在了解企業(yè)員工拖延行為的現(xiàn)狀，探討元認知與拖延行為的關系，從而提出在企業(yè)人力資源管理中如何減少拖延行為的建議。本研究使用廖燕然的工作拖延量表和WELLS等人編制的簡明元認知問卷對安徽省內(nèi)部分企業(yè)中的421名員工進行調(diào)查，探討了企業(yè)員工的拖延行為和元認知之間的關系，得出以下結論1、總體來說，安徽省內(nèi)的企業(yè)員工的拖延行為處于中等略微偏上的水平，在企業(yè)性質、工作類型、年齡方面存在顯著差異，在城市類別、性別、工作年限、婚姻狀況、受教育程度、職務級別方面不存在顯著差異。2、在元認知方面，企業(yè)員工的消極元認知處于中等偏上水平，并在年齡和職務級別上存在顯著差異。3、企業(yè)員工的元認知和拖延行為存在顯著正相關關系，消極元認知水平越高，其拖延行為越嚴重。企業(yè)員工的拖延行為與元認知中的認知自信、積極信念、不可控性和危險感、控制思維的需要均呈顯著正相關，與認知的自我意識呈顯著負相關。4、企業(yè)員工的元認知中的認知自信與不可控性和危險感對其拖延行為具有顯著的預測作用。

簡介：因艾滋病在全球傳播范圍很廣，其防治已成為一個國際性的重大課題。目前，由于HIV病毒的易變性，缺乏適當?shù)膭游锬Ｐ?，疫苗研制也面臨很大困難，現(xiàn)有抗病毒的治療藥物尚不能從根本上殺滅病毒，同時對患者免疫系統(tǒng)也造成很大的破壞。故在世界范圍內(nèi)尋找抗艾滋病病毒（HIV）的天然藥物研究正在蓬勃開展。本研究是在前期抗病毒活性篩選結果的基礎上，以天然產(chǎn)物經(jīng)一定工藝制成的藥物KFY為研究對象，以感染HIV病毒的MT4和PBMC細胞為細胞模型，以健康小鼠和免疫抑制小鼠為動物模型，研究了兩種加藥方式下本品和含藥血清的抗艾滋病毒作用和對動物免疫系統(tǒng)的作用；探索了本品對PBMC細胞超微結構的影響、對GP120及其不同受體區(qū)域結合的影響、對HIVDNA及RNA的影響以及對HIV逆轉錄酶的影響等抗病毒機理，為本品臨床研究和進一步尋找抗HIV前藥提供依據(jù)，同時建立抗HIV試驗平臺為類似的抗艾滋病毒藥物的研究提供思路。主要結果與結論如下一、藥效學研究（一）抗病毒藥效學研究采用先加藥后病毒感染后的方式，KFY對MT4和PBMC細胞中的HIV1病毒復制的治療指數(shù)分別為166±29和100±20；采用先病毒感染后加藥的方式，1％KFY對已感染PBMC細胞培養(yǎng)上清中和細胞裂解液中HIV1復制均有顯著抑制作用；血清抗病毒研究將81MLKG1KFY經(jīng)口給予大鼠（按體表面積系數(shù)計算相當于30倍人等效劑量），分離血清，去血清蛋白的KFY含藥血清干粉對MT4細胞中HIV復制治療指數(shù)在118148之間平均133。提示KFY對MT4細胞和PBMC細胞中HIV1SF33病毒復制有抑制作用。另外考察了KFY中4種組分抗HIV的相互作用，試驗測定不同濃度藥物組分單用及合用后抗病毒抑制率，利用COMBIDRUG軟件的中效原理設計和計算合用指數(shù)CI值。結果顯示，AB組分合用時以協(xié)同為主，大劑量趨向相加；CD組分合用小劑量拮抗，大劑量趨向相加；但ABCD四組分合用有很強的協(xié)同作用，提示ABCD組分在此配比下在MT4細胞中的抗病毒作用為協(xié)同關系。（二）對動物免疫系統(tǒng)影響的藥效學研究對健康小鼠免疫細胞功能影響小鼠用藥1周后，與對照組比較，不同劑量KFY組動物外周血白細胞數(shù)量及各淋巴細胞亞群無明顯差異；KFY可提高CONA和LPS刺激后淋巴細胞的增殖功能；顯著增強腹腔巨噬細胞吞噬功能及巨噬細胞IL1Β的分泌。對環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠免疫細胞功能影響經(jīng)口給予KFY一周后，KFY對外周血白細胞數(shù)量下降有保護作用；對小鼠外周血淋巴細胞亞群和淋巴細胞增殖無明顯影響；能增強小鼠腹腔巨噬細胞IL1Β分泌。提示KFY對外周血白細胞下降、腹腔巨噬細胞IL1Β分泌功能具有明顯的保護作用。二、機理研究（一）觀察采用3個健康人PBMC為試驗材料，觀察KFY對細胞生長及抗HIV1SF33感染時細胞超微結構變化。1和2KFY使PBMC胞體顯著增大，以胞漿增多為主，線粒體、內(nèi)質網(wǎng)增生，微絨毛增生，生長中后期細胞胞質內(nèi)多數(shù)空泡。先用HIV1SF33感染5天，再加受試物作用2天，觀察細胞的光學顯微鏡和透射電鏡病理形態(tài)學變化，1KFY使PBMC粗面內(nèi)質網(wǎng)增生、微絨毛增多，合胞體細胞形成、細胞間病毒顆粒及胞質內(nèi)高電子密度顆粒的數(shù)量減少，并使細胞器病變程度減輕。（二）分子水平研究本研究從對與GP120受體蛋白及受體不同區(qū)域結合的影響、對HIV病毒DNARNA和逆轉錄酶的影響等分子水平探討了本品抗HIV病毒的機理。為了觀察藥物對MT4細胞與HIV1GP120結合能力的影響，將MT4細胞與受試物混合培養(yǎng)1小時后洗去藥物，再加入HIV1GP120，測定各組細胞結合HIV1GP120的量，結果表明KFY對MT4細胞與GP120蛋白結合的IC50為134。進一步考察KFY對HIV1GP120不同位點與其抗體結合的影響，結果表明，KFY對HIV1GP120蛋白的V3區(qū)的影響比較大，對HIV1GP120與CD4的結合位點也有影響，對V1V2區(qū)的影響較小。用REALTIMEPCRRTPCR測定細胞內(nèi)HIVDNA和HIVRNA相對含量的△CT值，1KFY對HIVDNA和RNA有較強的抑制作用，抑制率達8899。用ELISA法測定供試品對感染MT4細胞中HIV病毒逆轉錄酶活性的影響結果表明，KFY對HIV病毒逆轉錄酶活性抑制作用較弱，治療指數(shù)平均為415±031。綜上所述，本研究以MT4細胞株、臨床分離PBMC細胞及動物為研究對象，用MTT法、酶聯(lián)免疫法、血球計數(shù)儀、3H摻入法液閃儀測定、流式細胞儀、放射免疫法、光鏡電鏡觀察、REALTIMEPCRRTPCR等手段，從細胞水平、EXVIVO、在體動物水平研究了KFY的抗HIV1病毒作用及免疫調(diào)節(jié)作用，從細胞水平及GP120受體、病毒DNARNA和逆轉錄酶等分子水平探索了本品的抗病毒的機理。本研究的主要研究結果及意義如下本品具有保護T細胞免受HIV感染、抑制HIV復制以及保護白細胞下降、促進淋巴細胞增殖、增強巨噬細胞功能等作用，可以作為一種應用于治療艾滋病的藥物進行進一步開發(fā)研究，本研究為下一步進行臨床研究提供了試驗依據(jù)。本研究所用的抗HIV研究模型，包括體外兩種細胞兩種加藥方式的抗HIV病毒模型、EXVIVO抗病毒模型、免疫學實驗動物模型、細胞學機制研究以及受體、遺傳物質、逆轉錄酶等分子水平的機制研究，為今后天然藥物抗HIV研究提供了參考和研究平臺。本研究首次應用中效原理法評價多組分之間的抗HIV作用關系，既有兩種藥物的聯(lián)合作用，又有四種藥物的聯(lián)合作用，既有拮抗作用，又有協(xié)同作用，為類似的多組分或多藥聯(lián)合作用的研究提供了思路。本研究首次將HIVGP120不同位點抗體應用于機理研究中，發(fā)現(xiàn)本品能夠抑制宿主細胞與HIVGP120的V3區(qū)域結合，對HIV逆轉錄酶抑制作用較弱，揭示了本品的作用機理提示今后在臨床研究中本品可以與逆轉錄酶抑制劑聯(lián)用，以減少交叉耐藥性，增強抗病毒作用。

簡介：學校代碼學校代碼10114分類號號R743碩士學位論文碩士學位論文（七年制臨床醫(yī)學碩士專業(yè)學位七年制臨床醫(yī)學碩士專業(yè)學位）RHEPO改善慢性腦缺血大鼠認知功能的作用機制的研究研究生王生王娟指導教師郭軍紅指導教師郭軍紅專業(yè)名稱神經(jīng)病學專業(yè)名稱神經(jīng)病學研究方向腦血管病、肌病研究方向腦血管病、肌病所在學院第一臨床醫(yī)學院所在學院第一臨床醫(yī)學院中國中國山西山西二〇一四年五月四日二〇一四年五月四日學位論文獨創(chuàng)性聲明學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文系在導師指導下本文獨立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明確標注或得到許可。論文內(nèi)容未包含法律意義上已屬于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他學位申請的論文或成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。本文如違反上述聲明，愿意承擔以下責任和后果1、交回學校授予的學位證書；2、學?？稍谙嚓P媒體上對作者本人的行為進行通報；3、本文按照學校規(guī)定的方式，對因不當取得學位給學校造成的名譽損害，進行公開道歉。4、本人負責因論文成果不實產(chǎn)生的法律糾紛。論文作者簽名日期年月日學位論文版權使用授權書學位論文版權使用授權書本人完全了解山西醫(yī)科大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權山西醫(yī)科大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表或使用學位論文或與該論文直接相關的學術論文或成果時，署名單位仍然為山西醫(yī)科大學。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定論文作者簽名日期年月日指導教師簽名日期年月日（本聲明的版權歸山西醫(yī)科大學所有未經(jīng)許可任何單位及任何個人不得擅自使用）

簡介：背景我國慢性丙肝患者已達1000萬，患者數(shù)量世界第一。在一項中國癌癥病因調(diào)查中顯示，丙肝病毒感染已經(jīng)成為肝細胞癌的重要原因。聚乙二醇干擾素聯(lián)合利巴韋林治療PRTHERAPY是我國常規(guī)抗病毒治療方案，但對于最迫切需要有效抗病毒治療的肝硬化患者反而由于合并血小板減少、肝功能減退等問題失去足量、足療程治療機會。目的觀察中國肝硬化患者接受常規(guī)抗病毒治療耐受性及效果并分析影響結局的因素，對不能接受常規(guī)抗病毒治療患者進行抗病毒前及抗病毒方案的優(yōu)化，并以持續(xù)病毒學應答SVR作為指標觀察優(yōu)化方法效果，并對成本效果進行分析。方法回顧性研究該院住院且明確診斷丙型肝炎肝硬化患者122例，前瞻性納入常規(guī)抗病毒治療肝硬化患者62例、合并血小板減少癥患者63例、不合并血小板減少癥應用蛋白酶抑制劑治療的肝硬化患者34例?；仡櫺匝芯恐袑颊咭话阗Y料及臨床檢查結果進行記錄、總結、分析，經(jīng)統(tǒng)計學分析得出與常規(guī)抗病毒療效可能相關因素前瞻性常規(guī)治療組研究中根據(jù)病情進行分組，對治療前情況及治療后的有效性指標、安全性指標進行觀察并統(tǒng)計兩組間的結果是否存在差異。同時對肝硬化患者治療前后進行分析，觀察肝硬化患者治療前后安全性及有效性指標變化應用脾臟切除手術、皮下注射血小板生成素、口服血小板受體激動劑三種方式對合并血小板減少癥的丙肝肝硬化患者進行干預，分析干預后接受PR抗病毒以及獲得SVR幾率常規(guī)抗病毒治療失敗患者改為BOCEPREVIRBOC聯(lián)合PR治療，觀察再次治療獲得SVR率，BOC聯(lián)合PR失敗患者改為SOFOSBUVIRSOF聯(lián)合DACLATASVIRDCV，觀察療效。結果肝硬化組持續(xù)病毒學應答率29％低于非肝硬化組的441％脾切除組患者PR治療完成率857％，SVR率619％，血小板生成素組則分別為529％和235％，血小板受體激動劑組開始SOF聯(lián)合PR治療率36％，SVR率4％BOC聯(lián)合PR治療SVR率524％，且均為之前PR治療中復發(fā)患者，未SVR的16例患者中4例自愿選擇改為SOF400MG日聯(lián)合DCV60MG日治療12周，均獲SVR。結論未合并血小板減少癥的代償期肝硬化患者對PR治療耐受性較好，但合并血小板減少癥患者如果不能得到有效糾正則很難完成常規(guī)PR治療，脾臟切除手術治療血小板減少癥效果優(yōu)于血小板刺激因子及血小板受體激動劑。PR治療失敗的基因IB型肝硬化患者接受BOC聯(lián)合PR治療一半患者可獲SVR，SOF聯(lián)合DCV效果可能更好。

簡介：南方醫(yī)科大學2009級博士學位論文腦白質微結構改變與帕金森病認知功能損害的關系THERELATIONSHIPBETWEENWHITEMATTERALTERATIONSANDCOGNITIVESTATUSINPARKINSON’SDISEASE課題來源國家自然科學基金30870863專業(yè)名稱學位申請人指導教師答辯委員會主席答辯委員會成員神經(jīng)病學鄧兵梅王麗娟教授梁秀齡教授形狐∥／●，飛似芬I陸正齊教授7彭英教授∥妙麥堅凝教城潘速躍教髟職徐書雯教授L昝張雄教授LZ伽論文評閱人徐恩教授徐安定教授劉雁教授2012年3月23日廣州摘要根據(jù)臨床經(jīng)驗并參考MMSE的認知項目設置和評分標準而制訂，是一種高效快速的MCI篩查工具。在MCI和早期阿爾茲海默病的篩查中，MOCA的敏感性高于MMSE。在早期PD患者中，執(zhí)行和視空間等認知域常被累及。由于MOCA納入了評估復雜視空間、執(zhí)行和注意功能的項目，提示該量表可能較MMSE更適合篩查PD患者的認知功能損害。目前，僅有四項研究比較了MOCA和MMSE在PD人群中的應用，均提示MOCA可能更適合PD患者認知功能損害的篩查。但是，這些研究具有一些局限性。這四項結果均沒有設置非PD的對照組，所以，其結果不能夠證實在非PD的正常MMSE總分的老年個體中，是否會在MOCA評估中顯示同樣水平的認知損害。在本研究中，我們假設MOCA在PD患者認知功能損害的篩查巾較MMSE更敏感，并克服了上述研究的局限性，設置了性別、年齡和受教育程度與PD組相匹配的正常對照組來比較兩個量表在篩查PD認知功能損害中的敏感性和特異性。即便是那些病程較長的PD患者，其常規(guī)磁共振通常是正常的。核醫(yī)學技術，如單光子發(fā)射計算機斷層成像術SINGLEPOTONEMISSIONCOMPUTEDTOMOGRAPHY，SPECT和正電子發(fā)射計算機斷層顯像POSITRONEMISSIONCOMPUTEDTOMOGRAPHY，PET使用特殊示蹤技術提供了最好的診斷的敏感性及特異性，但是由于裝置價格昂貴、實用性低而限制了其臨床應用。彌散張量成像DIFFUSIONTENSORIMAGING，DTI是一種新的磁共振MAGNETICRESONANCEIMAGING，MRI技術，能夠在三維空間內(nèi)定量分析活體組織內(nèi)水分子自由擴散速率和方向以間接評估白質纖維的完整性。由于DTI在腦白質體積丟失明顯前就能檢測到微結構改變，并且在顯示白質病理學的敏感性逐漸增加，越來越多地被應用于多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病如多系統(tǒng)萎縮、路易體癡呆、多發(fā)性硬化和肌萎縮側索硬化等疾病來測量活體的白質組織的微結構改變。但是關于PD患者白質改變的DTI研究卻非常少。最近的DTI研究顯示，PD患者的額葉、前運動區(qū)、扣帶、蒼白球、上縱束以及黑質紋狀體環(huán)路投射纖維等區(qū)域的部分各向異性FRACTIONALANISOTROPY，F(xiàn)A值下降，這提示在PD患者疾病早期即出現(xiàn)廣泛的腦白質微結構損害。H

簡介：目的內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)在認知功能方面發(fā)揮重要的生理作用。大麻素受體1基因CNR1單一編碼外顯子區(qū)存在突變1359G→A。探討大麻素受體1基因多態(tài)性與心臟手術患者術后早期認知功能障礙的關系。方法選取231例在全身麻醉及CPB下行心臟瓣膜置換手術的患者年齡2260歲，蒙特利爾認知評估MOCA評分≥26分）為研究對象進行研究。在麻醉前抽取患者血樣進行CNR11359GA基因型檢測。在術前1天及術后第7天采用MOCA量表（＜26分為發(fā)生POCD）和流調(diào)用抑郁量表CESD對患者進行神經(jīng)心理學測試，把患者分為POCD組和非POCD組。術后13天內(nèi)運用精神錯亂評估法CAMICU評估患者是否患有譫妄。記錄患者麻醉手術相關情況及術后并發(fā)癥的發(fā)生情況。結果231例樣本進行基因型分析，等位基因1359A的頻率是2445％兩組比較，其中AA基因型在POCD組中的比例少于非POCD組，但差異無統(tǒng)計學意義（X23129，P0209）。POCD組升主動脈阻斷時間、CPB時間、術后機械通氣時間、ICU監(jiān)護時間均長于非POCD組術后譫妄的發(fā)生率POCD組高于非POCD組，差異有統(tǒng)計學意義P＜005。發(fā)生術后譫妄的患者術后第7天有較低的MOCA評分。根據(jù)LOGISTIC回歸分析，CPB時間1700，P0090、術后譫妄史3910，P0017及術后機械通氣時間1698，P0034是術后認知功能損傷的危險因素。結論CB1R基因突變1359GA與心臟手術患者術后認知功能減退無明顯相關性。心臟手術中CPB時間、術后譫妄及術后機械通氣時間可能是術后認知功能損傷的危險因素。

簡介：分類號分類號R5學校代碼學校代碼10392學科專業(yè)代碼學科專業(yè)代碼100201學號號200902005福建醫(yī)科大學博士研究生畢業(yè)論文慢病毒介導的RNA干擾RPMI8226細胞MIC1表達抑制破骨細胞成熟的實驗研究LENTIVIRUSMEDIATEDRNAINTERFERENCEOFMIC1EXPRESSIONINRPMI8226CELLSINHIBITSHUMANOSTEOCLASTSMATURATION學位類型型醫(yī)學博士醫(yī)學博士所在學院院福建醫(yī)科大學第一臨床醫(yī)學院福建醫(yī)科大學第一臨床醫(yī)學院研究生生袁明洲袁明洲學科學科、專業(yè)專業(yè)內(nèi)科學內(nèi)科學導師師陳君敏陳君敏教授教授研究起止日期研究起止日期2009年10月至月至2013年2月答辯日期期2013年6月5日二○一三年五月2目錄英文縮略詞表1中文摘要3英文摘要6前言10第一部分TRANSWELL體系建立骨髓瘤微環(huán)境下破骨細胞成熟的實驗研究12材料與方法12結果15討論18第二部分MIC1真核表達載體的構建及鑒定20材料與方法20結果34討論41第三部分MIC1SHRNA干擾慢病毒系統(tǒng)有效干擾靶點的外源性篩選及慢病毒的包裝與濃縮45材料與方法45結果59討論67第四部分慢病毒介導的RNA干擾RPMI8226細胞MIC1表達抑制破骨細胞成熟的實驗研究70材料與方法70結果74討論79總結83參考文獻84綜述89致謝（99）附錄常用試劑配方100

簡介：第一部分不同T淋巴細胞中人HMGB1MRNA和蛋白的表達水平目的觀察HTLV1、TAX和TAXT淋巴細胞人HMGB1MRNA和蛋白的表達水平分析TAX蛋白是否影響HMGB1的表達。方法從TAXT細胞JURKAT和TAXN、TAXT細胞TAXP、HTLV1T細胞MT4、MT2提取總RNA和蛋白質以及瞬時轉染PCMVTAX表達載體及其突變型TAXM22、TAXM47至JURKAT細胞24H后提取總RNA和蛋白質。然后通過逆轉錄實時PCR定量檢測HMGB1MRNA表達水平分析TAX蛋白對HMGB1MRNA表達的影響通過免疫印跡檢測HMGB1蛋白表達水平分析TAX及其突變蛋白對HMGB1蛋白表達的影響。結果TAXT細胞TAXP中HMGB1MRNA和蛋白質表達水平明顯高于TAXT細胞JURKAT、TAXN。HTLV1T細胞MT2、MT4中的HMGB1MRNA表達水平略微低于HTLV1T細胞TAXP、JURKAT而HTLV1T細胞JURKAT和HTLV1T細胞MT2、MT4間HMGB1蛋白未表現(xiàn)出明顯的差異。瞬時轉染TAX及其突變型M22和M47至JURKAT細胞中TAX及其M22、M47突變蛋白促進HMGB1MRNA和蛋白的表達。結論HTLV1病毒TAX蛋白可能與某種轉錄因子相互作用促進人HMGB1基因的表達而HTLV1病毒的其他蛋白可能抑制HMGB1基因表達。了解不同T淋巴細胞中HMGB1基因表達情況為進一步研究TAX蛋白如何影響人HMGB1基因調(diào)控奠定了基礎。第二部分不同HMGB1熒光素酶報告基因及其JURKAT穩(wěn)定細胞株的構建目的構建不同高遷移率族蛋白B1HMGB1調(diào)控序列的熒光素酶報告基因及其穩(wěn)定表達的JURKAT細胞株為研究TAX蛋白影響HMGB1的轉錄調(diào)控提供質粒及細胞來源。方法設計多個3’端固定的HMGB1調(diào)控引物以JURKAT細胞基因組DNA為模板PCR擴增不同長度HMGB1調(diào)控基因8383、38383、68883、97583、116383、132783、152083均將其連入PMD18T載體并轉化宿主菌DH5A氨芐青霉素篩選陽性克隆并提取質粒經(jīng)KPNⅠHINDⅢ、BAMHⅠHINDⅢ雙酶切鑒定和DNA測序驗證正確的陽性克隆經(jīng)KPNⅠHINDⅢ雙酶切后連入PGL3NEOLUC報告基因的KPNⅠHINDⅢ位點之間成功構建含不同HMGB1調(diào)控基因的熒光素酶報告基因PGL3HMGB1LUC質粒。同樣152083HMGB1調(diào)控基因經(jīng)XHOⅠHINDⅢ雙酶切后連入PGL3NEOLUC報告基因的XHOⅠHINDⅢ位點之間又構建出含50483HMGB1的PGL3HMGB1LUC質粒。轉染不同PGL3HMGB1LUC和PGL3NEOLUC報告基因質粒至JURKAT細胞48H后加入終濃度600ΜGML的G418進行藥物加壓篩選20D然后選取單個陽性克隆細胞用300ΜGML繼續(xù)篩選23個月熒光素酶活性驗證是否成功構建其穩(wěn)定表達的JURKAT細胞株。結果以JURKAT細胞基因組為模板克隆擴增7個3’端固定的HMGB1調(diào)控基因成功構建了8種PGL3HMGB1LUC報告基因按HMGB1基因由短至長順序依次命名為PHLUC1PHLUC8。轉染PHLUC1PHLUC8報告基因和PGL3NEOLUC至JURKAT細胞經(jīng)G418藥物篩選成功構建含有PHLUC1PHLUC8或PGL3NEOLUC報告基因的JURKAT穩(wěn)定細胞株并根據(jù)HMGB1調(diào)控基因有無及其由短至長順序依次命名為HJ1HJ8細胞和NEO細胞。結論成功構建HMGB1熒光素酶報告基因及其HJ穩(wěn)定細胞株為找尋HMGB1啟動子區(qū)域研究TAX蛋白影響HMGB1基因的調(diào)控機制和HMGB1在成人T淋巴細胞白血病中的發(fā)病機制奠定基礎。第三部分HTLV1病毒TAX蛋白對人T淋巴細胞HMGB1基因轉錄調(diào)控的影響目的觀察不同T淋巴細胞中人HMGB1基因啟動子活性探討TAX及其M22、M47突變蛋白對HMGB1基因轉錄調(diào)控的影響。方法不同PGL3HMGB1LUC報告基因和PGL3NEOLUC對照同時瞬時轉染到THP1、HELA、JURKAT、TAXP、TAXN、MT4、MT2等不同種類細胞中以及不同PGL3HMGB1LUC報告基因與PCMVTAX或其突變型M22、M47PCMVNEO作為對照瞬時共轉染到JURKAT細胞中24H后檢測熒光素酶活性觀察不同細胞中相對熒光素酶活性比率HMGB1NEO和TAX及其M22、M47突變蛋白對T淋巴細胞中HMGB1基因的轉錄調(diào)控情況TAXNEO。TAX及其突變型TAXM22、TAXM47瞬時轉染到HJ穩(wěn)定細胞株HJ1HJ8PCMVNEO質粒作為對照比較不同HJ細胞株中HMGB1的相對熒光素酶活性TAXNEO。通過細胞接觸逆轉錄病毒轉染法HTLV1的MT2細胞HUT78細胞作為對照分別與HJ穩(wěn)定細胞株HJ1HJ8以14的比例進行共培養(yǎng)比較每種細胞株中HMGB1的相對熒光素酶活性MT2HUT78。比較TAX蛋白對瞬時表達HMGB1基因和穩(wěn)定表達HMGB1基因的轉錄調(diào)控差異。觀察BAY117082NFΚB抑制劑對TAX蛋白誘導HMGB1基因轉錄的影響。結果HMGB1在不同種類細胞中的調(diào)控趨勢大致相似均表現(xiàn)出587BP長度HMGB150483的啟動子活性最高。HTLV1T細胞MT4、MT2中HMGB1的轉錄活性略低于HTLV1T細胞JURKAT、TAXP。比較TAXNTAX和TAXPTAX細胞中HMGB1的轉錄活性發(fā)現(xiàn)TAX蛋白促進PHLUC6PHLUC8質粒中HMGB1基因的轉錄。不同PGL3HMGB1LUC報告基因與PCMVTAX共轉染到JURKAT細胞也顯示TAX蛋白對97583HMGB1基因影響不明顯但促進PHLUC6PHLUC8報告基因中HMGB1的轉錄表達。隨著TAX劑量的增加PHLUC6質粒中HMGB1的轉錄活性明顯增強。TAX及其突變型TAXM22、TAXM47與PHLUC3或PHLUC6共轉染至JURKAT細胞發(fā)現(xiàn)TAX及其M22、M47突變蛋白對PHLUC3質粒中HMGB1轉錄調(diào)控影響不明顯而促進PHLUC6質粒中HMGB1基因的轉錄。BAY117082NFΚB抑制劑不影響TAX蛋白調(diào)控HMGB1基因的轉錄。結論504383可能是HMGB1轉錄激活的關鍵啟動子區(qū)TAX蛋白可能結合在HMGB1的1163975區(qū)段誘導其轉錄但不是通過NFΚB途徑進行的。第四部分富集TAX蛋白的HMGB1基因生物信息學分析及TAX蛋白對其基因轉錄調(diào)控機制的研究目的探討TAX蛋白影響人T淋巴細胞HMGB1轉錄調(diào)控的基因片段、順式作用元件和轉錄因子。方法TAXP細胞經(jīng)固定、超聲和染色體免疫共沉淀CHIP處理后獲得純化的DNA通過特異性引物實時定量PCR擴增中心位點于1103和797處的HMGB1基因尋找TAX蛋白富集在HMGB1的基因部位。應用生物信息學初步分析HMGB11163975區(qū)段的反式作用因子結合位點通過野生型PHLUC6分別對其順式作用元件實施缺失突變構建不同突變型PHLUC6報告基因。在JURKAT中瞬時共轉染PCMVTAX和突變型PHLUC6野生型PHLUC6作為對照或PCMVTAXPCMVNEO作為對照和突變型PHLUC624H后檢測熒光素酶活性比較TAX蛋白對野生型和突變型PHLUC6中HMGB1的轉錄調(diào)控差異尋找TAX蛋白影響人T淋巴細胞HMGB1基因轉錄的關鍵轉錄因子。結果CHIP純化后的樣本經(jīng)實時定量PCR擴增后我們發(fā)現(xiàn)TAX蛋白在HMGB11103基因11631043的富集信號明顯強于797基因848746的信號。即TAX蛋白主要富集在HMGB1的1163975區(qū)段。生物信息學分析獲知HMGB11163975區(qū)段有6種反式作用因子AML1A、AP1、CDXA、USF、VMYB和CEBP。使用野生型PHLUC6分別針對每種轉錄因子的順式作用元件進行缺失突變重新成功構建分別針對上述6種轉錄因子的突變型PHLUC6依次命名為MLUC6AM、MLUC6AP、MLUC6CD、MLUC6U、MLUC6M、MLUC6C。瞬時共轉染PCMVTAX和野生型PHLUC6或其突變型PHLUC6至JURKAT細胞后發(fā)現(xiàn)突變型MLUC6C中HMGB1的轉錄活性低至野生型PHLUC6的52％并且在JURKAT細胞中TAX蛋白不影響MLUC6C中HMGB1基因的調(diào)控表達。結論TAX蛋白富集在HMGB1的1163975區(qū)段可能通過轉錄因子CEBP調(diào)控HMGB1基因的轉錄表達。了解TAX蛋白影響HMGB1基因轉錄的調(diào)控機制為ATL的臨床治療提供了一個新途徑。

簡介：手足口病HFOOTMOUTHDISEASEHFMD是嬰幼兒時期常見的傳染病以發(fā)熱和手足口部出現(xiàn)皰疹為主要特征輕者可以自愈重者可合并腦炎、無菌性腦膜炎、肺水腫等甚至死亡。1957年首例HFMD在多倫多被報道第2年從HFMD患兒標本中分離出CVA16病毒1972年美國加利福尼亞州爆發(fā)的HFMD疫情分離出了EV71病毒。自此以來世界范圍內(nèi)每年都會發(fā)生該病的流行常以大范圍散發(fā)、局部爆發(fā)的形式存在發(fā)病率和死亡人數(shù)逐年攀升。我國1981年自上海首次發(fā)現(xiàn)HFMD病例12HFMD在全國范圍內(nèi)迅速蔓延其中天津于1983年、1986年兩次發(fā)生HFMD爆發(fā)流行1998年中國臺灣省爆發(fā)的HFMD共監(jiān)測到129106病例死亡78例2011年全國累計報告手足口病病例1496048例其中重癥17775例死亡467人。據(jù)統(tǒng)計每隔23年就有一次大流行每年的感染病例在100萬以上3。2008年5月2日衛(wèi)生部將HFMD納入丙類法定傳染病4HFMD已成為危害我國社會安全的重大公共衛(wèi)生問題。引起HFMD的病原體有20多種CVA16和EV71是主要的病原體。EV71感染常常并發(fā)病毒性腦膜炎、腦炎、肺水腫、肺出血等嚴重并發(fā)癥可導致嬰幼兒的快速死亡故對于EV71的相關報道較多。且據(jù)往年的資料顯示EV71在中國大部分地區(qū)的重癥發(fā)病率大于CVA16。因此中國對于HFMD的研究主要集中于EV71包括藥物及疫苗的研究。相對EV71而言CVA16所致的HFMD癥狀較溫和且較少發(fā)生并發(fā)癥在以往的研究中常作為HFMD的輔助檢測項目。但近年有報道CVA16可能與心肌炎、難治性休克等致死性并發(fā)癥相關。在中國近年的HFMD流行中CVA16的發(fā)病率有升高的趨勢在某些地區(qū)甚至超過EV71成為優(yōu)勢血清型。從發(fā)病時間和地區(qū)來看形成CVA16和EV71交替或混合共流行的局面。且在臨床中二者的感染不易區(qū)分。因此加強對我國不同地區(qū)CVA16的病毒分離鑒定、致病機制及疫苗研究對防控HFMD具有重要意義。目的分離鑒定我國不同地區(qū)引起HFMD流行的柯薩奇病毒A組16型COXSACKIEVIRUSA16CVA16病毒株建立流行株感染乳鼠動物模型為深入探索CVA16病毒致病機制以加速預防疫苗研制、藥物篩選進程奠定基礎。方法1從我國北京、天津、山東、福建等地收集147份HFMD臨床樣本用VERO細胞分離病毒并進行RTPCR鑒定對CVA16的基因及毒力特點做出分析2將CVA16分離株經(jīng)過蝕斑純化、乳鼠適應后獲得一株能致死11日齡C57乳鼠的CVA16毒株命名為TS1008GENBANKJX068829。隨后將TS1008感染11日齡C57乳鼠觀察并記錄感染乳鼠體重變化、臨床得分及死亡率變化并通過實時定量RTPCR測定腦、骨骼肌、肺、心肌的病毒載量檢測組織病理、炎癥分子變化建立CVA16感染乳鼠模型。結果1從我國不同地區(qū)來源的147份HFMD臨床樣本中成功分離出16株CVA16、20株EV71、5株CVA16和EV71混合感染株測定CVA16滴度是105109進一步測定7株CVA16的全基因組序列并提交至GENBANK基于VP1核苷酸序列構建進化樹結果顯示全部分離株都屬于C1亞型均為我國主要流行株2將TS1008CVA16病毒株腹腔注射感染114日齡C57乳鼠結果顯示該TS1008CVA16病毒株可致死11日齡內(nèi)C57乳鼠測定病毒毒力為50LD50ML。對TS1008CVA16感染乳鼠測定病毒載量顯示感染后骨骼肌中病毒載量持續(xù)高于心肌、肺、腦中而心肌、肺、腦中病毒載量差別不大。6天發(fā)病高峰時做病理檢測發(fā)現(xiàn)骨骼肌、心肌、腦、肺中都有淋巴細胞浸潤但骨骼肌中最為嚴重且CVA16病毒感染期間MCP1MIP1ALPHACSF3和MIP1BETA炎性分子顯著升高推測炎性分子在CVA16感染HFMD中發(fā)揮著重要作用。結論從147份HFMD臨床樣本中分離得到了16株CVA16流行病毒株并完成了7株全基因組序列測定和13株VP1序列測定闡明了CVA16基因的特征篩選出一株乳鼠適應株TS1008建立了CVA16感染乳鼠模型為進一步深入闡明免疫致病機制、研發(fā)預防疫苗和治療藥物奠定了基礎。

簡介：抑制控制一直是眾多研究者所關注的重點抑制控制不僅可以解釋不同個體之間的差異和發(fā)展變化如智力、注意、記憶等。此外它也涉及情緒調(diào)節(jié)和社會能力的發(fā)展。關于抑制控制的理論和模型有很多從不同角度解釋了抑制控制的機制結構和作用等但在以往的研究中探討抑制控制影響因素的研究卻不多見僅有的研究主要集中在探究情緒對抑制控制的影響以及對認知加工速度和抑制控制關系的討論。本研究期望通過認知行為和ERP相結合的方法來探究認知負載對抑制控制的影響及其機制。本研究選取了認知負載中的工作記憶負載和注意負載分別運用行為學實驗和ERP實驗上來探討它們對抑制控制的影響。實驗設計通過參數(shù)法調(diào)制工作記憶和注意負載的水平來分別考察不同負載水平下被試完成抑制控制任務時的行為學成績和ERP特點。實驗選取了研究抑制控制的經(jīng)典范式GONOGO任務。在注意負載研究中行為學實驗通過改變視覺刺激的維度調(diào)節(jié)注意負載水平ERP實驗通過改變干擾字母的個數(shù)調(diào)節(jié)注意負載水平研究高低注意負載水平下抑制控制任務的成績。在工作記憶負載任務中行為學實驗采用兩位數(shù)、五位數(shù)和八位數(shù)調(diào)節(jié)記憶負載ERP實驗采用兩位數(shù)和八位數(shù)調(diào)節(jié)記憶負載水平研究在不同記憶負載水平下的抑制控制任務的成績。結果表明1、高注意負載下的抑制控制任務反應時顯著高于低注意負載下的抑制控制任務反應時。五位數(shù)工作記憶負載下的抑制控制任務的反應時顯著低于八位數(shù)工作記憶負載下的抑制控制任務的反應時。2、ERP實驗中被試抑制控制的成績與行為學的成績一致此外對特征波的分析表明注意負載的NOGO刺激的P3潛伏期顯著的晚于GO刺激下的P3潛伏期。工作記憶負載下NOGO刺激的N2潛伏期顯著的晚于GO刺激下的N2潛伏期。3、在認知負載的ERP試驗中NOGO刺激誘發(fā)的N2和P3波峰值大于GO刺激高認知負載刺激誘發(fā)的N2波峰值大于低認知負載刺激。低認知負載誘發(fā)的P3波峰值大于高認知負載刺激。上述結果提示1、當參數(shù)調(diào)節(jié)注意負載時注意負載影響抑制控制的任務成績。高注意負載下被試抑制控制的反應時長于低注意負載條件。2、當參數(shù)調(diào)節(jié)工作記憶負載時工作記憶負載影響抑制控制的任務成績。八位數(shù)工作記憶負載下被試抑制控制的反應時長于五位數(shù)工作記憶負載條件。3、抑制控制加工受認知負載的影響在腦電成分上表現(xiàn)為N2主要受工作記憶負載的影響P3主要受注意負載的影響。4、工作記憶負載和注意負載是抑制控制的影響因素。

簡介：受艾滋病影響兒童經(jīng)歷了非正常的生活環(huán)境造成的創(chuàng)傷性事件使他們的負面心理癥狀明顯。作為“雙重弱勢群體”不良的心理狀況對其個人、家庭、社會的影響都是巨大。目前國內(nèi)對受艾滋病影響兒童的研究多集中在教育、社會公共衛(wèi)生、撫養(yǎng)模式以及心理支持等方面絕大多數(shù)研究都基于問卷調(diào)查和心理干預的手段。鑒于近年來生理心理學技術本研究選取腎上腺激素皮質醇作為有效的測量標準展開了受艾滋病影響兒童認知疲倦和情緒調(diào)節(jié)策略使用特點的心理研究。本研究分為了日常和應激兩種狀態(tài)對不同程度的認知疲倦和情緒調(diào)節(jié)策略使用對受艾滋病影響兒童的皮質醇水平和變化特點進行了測量。研究一中采用了問卷調(diào)查和生物檢測的方法建立了在日常狀況下受艾滋病影響兒童的皮質醇水平及變化模型。并選用能顯示外界刺激對皮質醇影響最顯著的CAR覺醒時皮質醇水平作為測量指標驗證了此類兒童的不同程度的認知疲倦以及情緒調(diào)節(jié)策略對其生物激素的影響從而導致個體心理的變化。研究二模擬了應激考試情景以此作為應激壓力源測量并建立了受艾滋病影響兒童皮質醇的應激水平和變化模型考察了具有不同程度認知疲倦和情緒調(diào)節(jié)策略對受艾滋病影響兒童在應激狀態(tài)下皮質醇的水平和變化影響。最后得出以下結論第一在日常學習生活狀態(tài)受艾滋病影響兒童的唾液皮質醇的變化規(guī)律符合皮質醇的節(jié)律常模即在覺醒后皮質醇的體內(nèi)含量將在3045分鐘之內(nèi)迅速上升并達到峰值此后迅速下降但在下午過后其下降速度減慢在凌晨降至最低值第二受艾滋病影響兒童的認知疲倦水平會影響他們皮質醇的覺醒水平CAR即認知疲倦程度高的兒童會有一個較低的CAR水平第三在日常學習生活中選擇使用重新評價情緒調(diào)節(jié)策略的受艾滋病影響兒童日常唾液皮質醇變化水平越大周期變化越顯著。第四在應激狀態(tài)下受艾滋病影響兒童情緒調(diào)節(jié)策略的使用不能顯著預測唾液皮質醇的變化水平。

簡介：汕頭大學醫(yī)學院碩士學位論文碩士學位論文題目帕金森病患者認知功能障礙與血尿酸、同型半胱氨帕金森病患者認知功能障礙與血尿酸、同型半胱氨酸關系的臨床研究酸關系的臨床研究英文題目英文題目THECLINICALSTUDYOFCOGNITIVEDYSFUNCTIONANDSERUMURICACID、HOMOCYSTEINEINPATIENTSWITHPARKINSON’SDISEASES姓名蔡毓凡學號200671103所在學院汕大醫(yī)學院導師姓名李森美專業(yè)神經(jīng)病學入學日期2006年8月答辯日期2013年5月汕頭大學醫(yī)學院碩士學位論文帕金森病患者認知功能障礙與血尿酸帕金森病患者認知功能障礙與血尿酸、同型半胱氨酸關系的臨床研究同型半胱氨酸關系的臨床研究THECLINICALSTUDYOFCOGNITIVEDYSFUNCTIONANDSERUMURICACID、HOMOCYSTEINEINPATIENTSWITHPARKINSON’SDISEASES年級2006級專業(yè)神經(jīng)病學學位申請人蔡毓凡導師李森美主任醫(yī)師汕頭大學醫(yī)學院2013年5月中國汕頭

簡介：學位論文腦微出血的危險因素及其對認知功能影響的腦微出血的危險因素及其對認知功能影響的臨床研究臨床研究STUDYONRISKFACTSFCEREBRALMICROBLEEDSITSEFFECTONCOGNITIVEFUNCTIONINPATIENTSWITHLACUNARINFARCT汪國宏汪國宏指導教師姓名指導教師姓名吳君倉吳君倉副教授副教授安徽醫(yī)科大學附屬合肥醫(yī)院安徽醫(yī)科大學附屬合肥醫(yī)院申請學位級別申請學位級別碩士碩士專業(yè)名稱神經(jīng)病學神經(jīng)病學提交論文日期提交論文日期201403論文答辯日期論文答辯日期201405學位授予單位和日期學位授予單位和日期安徽醫(yī)科大學安徽醫(yī)科大學201406答辯委員會主席答辯委員會主席評閱人2014年05月分類號密級UDC編號

簡介：目的目前，對慢性乙型肝炎CHONICHEPATITISB，CHB合并非酒精性脂肪性肝病NONALCOHOLICFATTYLIVERDISEASE，NAFLD患者的抗病毒方案無明確的指導意見，且西醫(yī)對NAFLD尚無有效治療藥物，而中醫(yī)藥在此方面療效良好。本研究擬比較CHB合并NAFLD與CHB患者抗病毒療效的差異，并探討血清IL21水平與CHB合并NAFLD抗病毒應答的關系，以及評價抗病毒藥物聯(lián)合中藥治療對CHB合并NAFLD患者的療效和血清IL21水平的影響，為該類患者的臨床決策提供循證依據(jù)。方法選取單純CHB患者20例設為A組，另外選取符合中醫(yī)肝郁脾虛，濕熱瘀阻的證型的CHB合并NAFLD患者40例，隨機分成B組和C組，每組20例，三組均滿足HBEAG陽性CHB的抗病毒指征。三組患者均口服恩替卡韋05GD。B組、C組按NAFLD治療標準給予飲食療法，C組加用中藥祛濕活血方治療。觀察各組患者治療前和治療后第12周、24周后BMI、肝功能、血脂、乙肝兩對半定量、HBVDNA、血清IL21、肝脾CT比值等指標的變化并進行比較分析。結果1與A組比較，第12周、24周B組HBVDNA檢測不到率、ALT復常率較低，差異有統(tǒng)計學意義P＜005與B組比較，C組12周后HBVDNA檢測不到率、ALT復常率差異無統(tǒng)計學意義P＞005，但24周后差異有統(tǒng)計學意義（P＜005）。各組間第12周、24周后HBEAG轉陰率差異均無統(tǒng)計學意義P＞005。2與A組比較，B組治療前和第12周、24周后血清IL21水平均低，差異有統(tǒng)計學意義P＜005或P＜001與B組比較，治療前C組血清IL21差異無統(tǒng)計學意義P＞005，第12周和第24周后均較高P＜005。3SPEARMAN相關分析IL21與肝功能、血脂、HBSAG、HBEAG、HBVDNA等臨床療效指標變化情況的關系發(fā)現(xiàn)，12周時IL21的升高和TG、BMI、HBEAG、HBVDNA的下降相關R0359，0451，0482，0545，P＜005或P＜001。4ROC曲線分析基線IL21水平對第12周結果基線IL21水平對12周后HBVDNA轉陰預測的AUCCI086900001000，P＜001當截取值為721PGML時靈敏度為1000％，特異性667％第24周的AUCCI083500001000，P＜001），當截取值為7865PGML時靈敏度為846％，特異性857％。5與B組比較，C組治療前中醫(yī)癥候積分和總積分均無統(tǒng)計學意義差異P＞005，而第12周、24周后癥候積分明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義P＜001。6與B組比較，C組第12周、24周TC、ΓGT、TG、BMI、肝脾CT值均明顯降低P＜005或P＜001。2組間與治療前的差值比較，第12周后TC、BMI差異有統(tǒng)計學意義（P＜005或P＜001）第24周后TC、肝脾CT值差異有統(tǒng)計學意義P＜001。結論1HBEAG陽性的CHB合并NAFLD患者第12周、24周抗病毒療效均差于單純CHB者，可能與NAFLD導致CHB患者的血清IL21水平降低有關，而血清IL21水平升高有助于HBV的清除。2基線較高的血清IL21水平對CHB合并NAFLD患者第12周、24周HBVDNA轉陰有較高的的預測價值。3采用祛濕活血中藥方治療NAFLD可以有效提高CHB合并NAFLD患者的抗病毒療效。

簡介：點擊查看更多丁茄抗H5N1病毒活性成分研究.pdf精彩內(nèi)容。