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簡介：目的探討磁共振增強劑超順磁性納米鐵顆粒SUPERPARAMAGICIRONOXIDE，SPIOFERIDEX標記人FLK1CD31CD34間充質(zhì)干細胞HUMANMESENCHYMALSTEMCELLS，HMSCS對其表型、細胞活性、增殖能力及向神經(jīng)方向分化能力的影響，為磁共振成像技術追蹤磁標記移植細胞提供可靠的理論依據(jù)。方法使用轉(zhuǎn)染劑介導法標記，以含F(xiàn)ERIDEX50ΜGML及多聚賴氨酸POLYLYSINE，PLL15ΜGML的培養(yǎng)基與HMSCS共同孵育1218小時。FEFIDEX標記后行普魯士藍染色測定標記率及標記效率隨細胞數(shù)目和時間產(chǎn)生的變化、透射電鏡觀察細胞內(nèi)鐵顆粒分布。通過臺盼藍染色、生長曲線測定及流式細胞儀檢測FERIDEX對細胞活性、生長能力及細胞表型的影響。采用化學誘導法10MMOLLΒ巰基乙醇及神經(jīng)營養(yǎng)因子誘導法100NGML堿性成纖維細胞生長因子在體外誘導HMSCS向神經(jīng)方向分化。免疫熒光方法檢測誘導后對照組及實驗組HMSCS神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞特異標記物NF、MAP2、GFAP和GALC的表達，通過IMAGEPROPLUS60軟件測定熒光OD值，比較兩組間差異。結果使用含F(xiàn)ERIDEX50ΜGML及PLL15ΜGML的培養(yǎng)基標記HMSCS，標記效率可達96％。電鏡檢測顯示，實驗組細胞胞內(nèi)可見黑色顆粒，以胞漿為主，細胞超微結構與對照組相比無顯著性差異。標記后對照組及實驗組細胞活性均超過97％；流式細胞儀檢測，對照組及實驗組細胞CD44、CD105、FLK1均為陽性，CD31、CD34均為陰性。FERIDEX標記后1周，細胞生長能力及活性與對照組相比無顯著性差異。FERIDEX標記效率隨觀察時間延長及細胞數(shù)目增加而逐步下降?；瘜W誘導法誘導后兩組細胞均表達NF，MAP2及GFAP均為陰性；神經(jīng)營養(yǎng)因子誘導法誘導后兩組細胞NF、GFAP、GALC均為陽性。兩種方法誘導HMSCS向神經(jīng)方向分化后，測定NF、MAP2、GFAP、GALC免疫熒光OD值，二組間OD值無顯著性差異。結論1、采用FERIDEX50ΜGML及PLL15ΜGML可有效標記HMSCS。2、FERIDEX標記效率隨時間延長及細胞數(shù)目增多逐漸下降。3、FERIDEX對HMSCS增殖能力、細胞活性、細胞表型及向神經(jīng)方向分化能力均無顯著性影響。FERIDEX作為磁共振活體示蹤劑，是安全、高效的。

簡介：江蘇大學碩士學位論文YB1在血液系統(tǒng)腫瘤中的表達及其對耐藥白血病細胞生物學特性的影響姓名周磊磊申請學位級別碩士專業(yè)內(nèi)科學指導教師許文林20070609江蘇大學碩士論文V檢測白血病細胞的凋亡程度；采用MTT法檢測轉(zhuǎn)染前后化療藥物的IC50值變化，RTPCR和流式細胞儀檢測轉(zhuǎn)染前后細胞中的MDRLMRNA和PGP表達的變化；采用基因芯片技術比較陽性轉(zhuǎn)染組與對照組細胞的基因表達的差異。結果DLBCL組與RLH組的YB1胞漿陽性表達率無明顯差異E0763，而DLBCL組的YB1胞核陽性表達率明顯高于RLH組尸O05；DLBCL臨床III～Ⅳ期、結外淋巴組織侵犯及骨髓浸潤患者的YB1胞核陽性表達率明顯高于I～II期、結內(nèi)病變及無骨髓浸潤患者，差異有統(tǒng)計學意義PO05；DLBCL組與RLH組均出現(xiàn)PGP的表達，兩組的總體表達率無明顯差異∽O05，PGP的表達強度與DLBCL患者的性別、年齡、臨床分期、結內(nèi)外浸潤及有無骨髓浸潤無明顯相關性PO05；YB1的核陽性表達與PGP的表達強度70950，P0005及PCNA積分尸O930，P0005均呈正相關；化療有效組的YB1核陽性表達率明顯低于化療無效組EO038化療有效組的PGP表達強度顯著低于化療無效組PO001。針對YB1第5B顯子325343、381399和430448位點設計的三個SHRNA片段和隨機片段HK成功克隆KPGENESIL一1質(zhì)粒中，產(chǎn)生重組質(zhì)粒PGENSIL一1／U6／YBXL1，PGENSIL1FU6／YBXL2，PGENSIL1／U6／YBXL3及PGENSIL1FU6／HK，酶切及Ⅸ蛆測序分析顯示，重組質(zhì)粒SHRNA編碼序列與設計片斷的序列完全一致。成功構建了針對YB1的特異性SHRNA真核表達載體。通過脂質(zhì)體法將YB1S樅和HK重組載體轉(zhuǎn)染進K562／A02細IL

簡介：APRIL2011原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本人的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律責任由本人承擔。學位論文作者氧珈日期年月日＼J學位論文使用授權聲明本人在導師指導下完成的論文及相關的職務作品，知識產(chǎn)權歸屬鄭州大學。根據(jù)鄭州大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或者氣體復制手段保留論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表、使用學位論文或與學位論文直接相關的學術論文或成果時，第一署名單位仍然為鄭州大學。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。學位論文作霉昂日期年月日

簡介：甘露聚糖結合凝集素MANNANBINDINGLECTIN，MBL是哺乳動物C型凝集素超級家族中膠凝素家族成員，主要由肝細胞分泌，作為糖蛋白存在于血漿中。通過其糖識別域CARBOHYDRATERECOGNITIONDOMAIN，CRD識別病原體表面糖結構，通過其膠原樣區(qū)COLLAGENLIKEREGION，CLR與2個MBL相關絲氨酸蛋白酶MBLASSOCIATEDSERINEPROTEASE，MASP1，MASP2結合，以不依賴抗體和C1Q的凝集素途徑激活補體，發(fā)揮溶破和間接調(diào)理功能，還能與吞噬細胞表面膠凝素受體結合而起直接調(diào)理作用。MBL的識別譜廣泛，在天然免疫中發(fā)揮重要作用。MBL基因在人群中突變頻率極高，已知3個MBL結構基因點突變可導致MBL蛋白空間結構改變，與糖基配體和MASPS結合的能力降低，補體凝集素激活途徑幾乎完全消失，臨床上表現(xiàn)為各種病原體的急慢性反復感染。人血漿MBL含量極低，從血漿中大量提取MBL用于科研和臨床，花費昂貴。通過基因工程、細胞培養(yǎng)等技術，體外大規(guī)模制備MBL，將為進一步研究MBL，在免疫系統(tǒng)中的作用以及臨床上MBL缺損的治療提供條件。本課題組曾成功構建了兩個野生型MBL，真核表達載體，PCDNA31MBL和PCDNA4HISMAXCMBL，并用電穿孔法分別轉(zhuǎn)染入CHO、HEK293和HEPG2細胞，經(jīng)G418和ZEOCIN選擇轉(zhuǎn)染子并克隆化培養(yǎng)，獲得表達重組人MBL的細胞株。通過RTPCR和ELISA等方法分析比較，發(fā)現(xiàn)PCDNA31MBL在CHO和HEK293細胞中能夠大量合成RNA，其表達效率顯著高于其他載體和細胞的組合。因此，本研究采用本室保存的已轉(zhuǎn)染了PCDNA31MBL真核表達載體的CHO細胞株進行為期2個月的篩選，通過ELISA技術篩選高表達單克隆細胞株，然后擴大培養(yǎng)，分離純化其表達的蛋白產(chǎn)物，并對其生物學特性進行深入研究。一、雙抗夾心ELISA體系的建立用抗MBLCRD單克隆抗體捕獲，辣根過氧化物酶標記的抗MBLCLR多克隆抗體檢測，以丹麥AARHUS大學JENSCHRJENSENIUS教授贈送的重組人MBL蛋白作為標準品，來篩選細胞培養(yǎng)上清中目的蛋白含量較高的細胞株，以獲得高表達重組人MBL蛋白的細胞克隆。該檢測體系靈敏度可達01MGL。二、篩選穩(wěn)定高效表達重組人MBL蛋白的細胞株本課題組已構建了含PCDNA31MBL真核表達載體的CHO細胞。將其復蘇后，在96孔板中單克隆化，待細胞克隆長至孔底的14后，挑取細胞株置12孔板內(nèi)培養(yǎng)24H后，以800MGL的G418加壓篩選。隨后的1個月中，每隔3～5天換液一次，維持G418濃度為800MGL。然后，通過雙抗夾心ELISA體系篩選得到6株高表達的單克隆細胞株，其上清中目的蛋白濃度均在3MGL以上。RTPCR分析表明，這些轉(zhuǎn)染了MBL基因的CHO細胞能穩(wěn)定轉(zhuǎn)錄MBLMRNA。三、重組人MBL蛋白的純化及其生物學特性研究利用硫酸銨沉淀法初步純化表達產(chǎn)物，鼠抗人MBLCRDMAB親和層析柱進一步純化，獲得重組人MBL蛋白。在1L培養(yǎng)上清中可獲得2MG左右目的蛋白。經(jīng)ELISA鑒定，純化后的蛋白產(chǎn)物可與抗MBL單克隆抗體、抗MBLCRD單克隆抗體、抗MBLCIR多克隆抗體結合。通過非還原SDSPAGE和WESTERNBLOT分析，重組人MBL分子量多集中在MR200000以上，為三至六聚體形式。結合實驗證明所純化的重組MBL，蛋白能與甘露聚糖及重組MASP蛋白有效結合；C4D沉積實驗表明重組人MBL蛋白和血漿來源MBL均能有效介導補體激活，而這種介導作用可被競爭性糖類抑制。另外，用C4D沉積試驗檢測保存于不同溫度下6個月的重組蛋白介導補體激活的功能，發(fā)現(xiàn)其穩(wěn)定性良好，活化補體活性無明顯降低。

簡介：ZHENGZHOUUNIVERSITYFORTHEDEGREEOFMASTEREFFECTSOF1，25一OH2D3ONTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFPORCINEAMELOBLASTSBYXIANLIZENGSUPERVISORPROFHONGYUZHAOSTOMATOLOGYMEDICALSCHOOLMAY2010原創(chuàng)性聲明㈣㈣IIILL㈣IHILL舢ILIII洲UIIILL㈣11IIIIY1832932本人學位論文是在導師指導下獨立撰寫并完成的，學位論文沒有剽竊、抄襲等違反學術道德、學術規(guī)范的侵權行為，否則，本人愿意承擔由此產(chǎn)生的一切法律責任和法律后果，特此聲明。學位論文懈穆鈾嗍2啪年石月匆日學位論文使用授權聲明本人在導師指導下完成的論文及相關的職務作品，知識產(chǎn)權歸屬鄭州大學。根據(jù)鄭州大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表、使用學位論文或與該學位論文直接相關的學術論文或成果時，第一署名單位仍然為鄭州大學。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。學位論文憾曾鉑嗍2Ⅲ年∥肌日

簡介：分類號分類號R57R57學校代碼學校代碼1039210392學科專業(yè)代碼學科專業(yè)代碼100201100201學號號21210032752121003275密級級碩士學位學位論文論文微小微小RNA423RNA4235P5P調(diào)控三葉因子調(diào)控三葉因子1基因表達及對胃黏膜基因表達及對胃黏膜上皮細胞上皮細胞生物學行為生物學行為影響影響EFFECTSOFMIRNA4235PONTREFOILFACTOR1EXPRESSIONANDONBIOLOGICALBEHAVIOROFGASTRICMUCOSALEPITHELIALCELLS學位類型型醫(yī)學碩士醫(yī)學碩士所在學院院協(xié)和臨床醫(yī)學院協(xié)和臨床醫(yī)學院申請人姓名申請人姓名陳國彬陳國彬?qū)W科學科、專業(yè)專業(yè)內(nèi)科學（消化）內(nèi)科學（消化）導師師任建林任建林教授教授研究起止日期研究起止日期20132013年7月至月至20152015年4月答辯委員會主席答辯委員會主席王小眾王小眾教授教授答辯日期期20152015年0505月1111日二○一五○一五年四月福建醫(yī)科大學碩士學位論文II目錄附錄附錄1中文摘要中文摘要3英文摘要英文摘要4第1章前言前言611三葉因子612MIRNA與TFFS表達調(diào)控7第2章材料和方法材料和方法1021實驗材料10211組織標本10212細胞株10213引物10214主要實驗試劑10215主要儀器耗材11216主要試劑的制備1122實驗方法13221細胞培養(yǎng)13222瞬時轉(zhuǎn)染14223RNA提取與RTPCR15224實時熒光定量PCR19225WESTERNBLOT蛋白印跡21226HE染色技術22227免疫組織化學技術23228MTT25229EDU252210集落實驗262211劃痕實驗27

簡介：腦膠質(zhì)瘤是人類中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的腫瘤之一，在成人和兒童5060％的顱內(nèi)腫瘤都是腦膠質(zhì)瘤，腦膠質(zhì)瘤發(fā)生率大概642例100000。腦膠質(zhì)瘤患者5年存活率不到30％。本研究首次探討了KIF2A基因在腦膠質(zhì)瘤組織中的表達情況并通過體外實驗研究了KIF2A基因在腦膠質(zhì)瘤細胞遷移，侵襲，增殖和凋亡中的作用及分子機制最后初步探討了KIF2A基因和在腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移過程中起到非常重要作用的HIF1Α基因的關系。第一部分KIF2A在腦膠質(zhì)瘤中的表達及意義目的研究KIF2A在腦膠質(zhì)瘤組織中的表達及臨床意義。方法標本收集收集遼寧醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院2008～2013年間原發(fā)性腦膠質(zhì)瘤組織標本35例，另收集2014年山東大學齊魯醫(yī)院神經(jīng)外科住院患者手術切除的新鮮腦膠質(zhì)瘤組織35例，作為實驗組。且所有患者術前均未進行放療、化療等其他治療，并與患者或監(jiān)護人簽署實驗知情同意書后進入實驗進行研究。同時取20例正常尸檢的腦組織標本做為對照組。所有入組組織標本按照WHO2000標準進行分級，ⅠⅡ級15例，ⅢⅣ級20例男23例，女12例平均年齡（470歲）。1應用免疫組化法檢測高級別的腦膠質(zhì)瘤組織和正常腦組織，不同級別的腦膠質(zhì)瘤組織KIF2A蛋白的表達情況。探討在高級別腦膠質(zhì)瘤組織和正常腦組織及不同級別的腦膠質(zhì)瘤組織中KIF2A蛋白的表達情況及相互關系。2應用REALTIMEPCR法檢測新鮮腦膠質(zhì)瘤組織中KIF2A的MRNA表達情況與臨床病理參數(shù)的關系。探討在不同級別腦膠質(zhì)瘤組織中KIF2A的MRNA表達情況及相互關系。結果免疫組化結果顯示35例高級別腦膠質(zhì)瘤組織和20例正常腦組織中都有KIF2A的陽性表達，與正常腦組織比較，高級別腦膠質(zhì)瘤組織表達率高于正常腦組織，且有統(tǒng)計學差異P0001。免疫組化檢測35例不同級別的腦膠質(zhì)瘤組織，高級別腦膠質(zhì)瘤組織表達率高于低級別腦膠質(zhì)瘤P0044。KIF2A蛋白主要表達在胞質(zhì)及胞核，呈棕黃色顆粒，在高級別腦膠質(zhì)瘤細胞胞漿中染色較強，在低級別腦膠質(zhì)瘤細胞和正常腦組織細胞中染色較淺。REALTIMEPCR法檢測新鮮膠質(zhì)瘤組織中KIF2A的MRNA表達。KIF2A表達隨著腦膠質(zhì)瘤級別增高而增強P0033。結論KIF2A在高級別腦膠質(zhì)瘤中強表達，在低級別腦膠質(zhì)瘤和正常腦組織弱表達。KIF2A的表達水平與腦膠質(zhì)瘤的病理分級，臨床分期相關。第二部分KIF2A基因沉默對腦膠質(zhì)瘤A172增殖、凋亡、侵襲遷移的影響目的探討SIRNA介導的KIF2A基因沉默對腦膠質(zhì)瘤A172細胞系細胞增殖、凋亡及侵襲遷移能力的影響探討KIF2A基因沉默后抑制人膠質(zhì)瘤細胞生長、侵襲及轉(zhuǎn)移的分子機制。方法1人腦膠質(zhì)瘤細胞株篩選腦膠質(zhì)瘤細胞系A172和U251細胞常規(guī)進行復蘇，傳代，獲取細胞，37℃，5％C02飽和濕度條件下，在含10％胎牛血清和DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)，提取A172和U251細胞的總RNA，逆轉(zhuǎn)錄成CDNA，進行PCR擴增，確定人腦膠質(zhì)瘤A172細胞作為研究對象。2質(zhì)粒干擾率的測定將細胞分KIF2ASIRNA組和SCRAMBLEDSIRNA對照組，將對數(shù)生長期的A172細胞以2105數(shù)目接種于6孔培養(yǎng)板中。用脂質(zhì)體LIPOFECTAMINE2000分別轉(zhuǎn)染KIF2ASIRNA和SCRAMBLEDSIRNA。轉(zhuǎn)染后48H，收集細胞，提取細胞總RNA和總蛋白，應用RTPCR方法檢測不同實驗組中KIF2A的基因表達。應用WESTERNBLOT方法檢測不同實驗組中KIF2A的蛋白表達。分析不同實驗組中A172細胞KIF2A的基因、蛋白表達情況。評價KIF2ASIRNA組干擾效率。3利用CCK8檢測KIF2A基因沉默對腦人膠質(zhì)瘤細胞系A172細胞增殖能力的影響分別將指數(shù)生長期A172KIF2ASIRNA組和對照組細胞消化計數(shù)后按1104個孔接種于96孔細胞培養(yǎng)板中，培養(yǎng)3天，于第0、24、48和72H，采用CCK8方法檢測各組細胞增殖情況。4流式細胞術檢測KIF2A基因沉默對人腦膠質(zhì)瘤細胞系A172細胞的凋亡率變化取各組細胞消化計數(shù)后按2105孔接種于12孔板中，待細胞融合至約80％，收集細胞，ANNEXINⅤ和PI染色后流式細胞儀檢測細胞凋亡率變化。5TRANSWELL小室細胞侵襲實驗檢測KIF2A基因沉默對人腦膠質(zhì)瘤細胞系A172細胞侵襲遷移能力的影響。取各組無血清A172細胞懸液100ΜL加入小室的上室，下室加入600ΜL含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，培養(yǎng)16H。光鏡下計數(shù)侵襲到濾膜背面的穿膜細胞數(shù)，評價細胞的侵襲遷移能力。6明膠酶譜法檢測KIF2A基因沉默對人腦膠質(zhì)瘤細胞A172細胞MMP2、MMP9的表達的影響。7WESTERNBLOT檢測KIF2A基因沉默對人腦膠質(zhì)瘤細胞系A172細胞PI3KAKT和MAPKERK信號通路的影響。8WESTERNBLOT檢測KIF2A基因沉默對人腦膠質(zhì)瘤A172細胞MMP2、MMP9蛋白表達的影響。結果1KIF2ASIRNA能夠有效下調(diào)KIF2A的表達。QRTPCR檢測KIF2ASIRNA敲除24H，48H時A172細胞中KIF2A的表達，發(fā)現(xiàn)48H的敲除效率高P0003。WESTERNBLOT進一步驗證A172細胞中KIF2ASIRNA較對照組敲除48H時的效率高。2CCK8法檢測KIF2A敲除對A172細胞增殖的影響。發(fā)現(xiàn)隨著時間延長，A172細胞KIF2ASIRNA敲除組增殖率顯著低于對照組。3ANNEXINⅤPI法檢測KIF2ASIRNA及SCRAMBLEDSIRNA兩組敲除48H時A172細胞凋亡率。發(fā)現(xiàn)KIF2A敲除組較對照組相比，KIF2A敲除組顯著上調(diào)A172的凋亡率P＜00001。4TANSWELL小室細胞侵襲實驗結果顯示KIF2ASIRNA敲除組A172細胞侵襲遷移顯著低于對照組。5明膠酶譜檢測發(fā)現(xiàn)KIF2ASIRNA敲除組上清中MMP2、MMP9的活性顯著低于SCRAMBLEDSIRNA組。6WESTERNBLOT分析發(fā)現(xiàn)KIF2ASIRNA敲除組中，與膠質(zhì)瘤細胞侵襲、遷移相關的AKT磷酸化水平下調(diào)MMP2蛋白表達水平下調(diào)。與膠質(zhì)瘤細胞增殖相關的P38MAPK磷酸化水平下調(diào)。結論1KIF2ASIRNA能夠有效的抑制A172細胞中KIF2A的表達，KIF2A基因沉默后A172細胞增殖、侵襲和遷移能力明顯降低，凋亡水平升高。2KIF2A通過PI3KAKT和MAPKERK信號轉(zhuǎn)導通路在腦膠質(zhì)瘤細胞的惡性生物學行為中起著重要的作用。3KIF2A通過MMP調(diào)控人腦膠質(zhì)瘤的侵襲轉(zhuǎn)移能力。第三部分HIF1Α在腦膠質(zhì)瘤中的表達和意義及和KIF2A的關系目的研究HIF1Α在腦膠質(zhì)瘤組織中的表達及臨床意義，并分析其與KIF2A之間的關系。方法收集山東大學齊魯醫(yī)院神經(jīng)外科20132014年住院患者手術切除的新鮮腦膠質(zhì)瘤組織35例，所有標本病理證實是人腦膠質(zhì)瘤組織并制備成石蠟切片，所有患者均為原發(fā)性，術前未行放療、化療和其他治療，所有患者及監(jiān)護人被告知進行實驗。所有患者組織標本診斷按照WHO2000標準進行分級，ⅠⅡ級15例，ⅢⅣ級20例男23例，女12例平均年齡（470歲）。應用免疫組化法檢測不同級別的腦膠質(zhì)瘤組織HIF1Α蛋白的表達情況。檢測在不同級別的腦膠質(zhì)瘤組織中HIF1Α蛋白的表達情況，并探討KIF2A與HIF1Α在腦膠質(zhì)瘤組織中表達相關性。結果1HIF1Α蛋白表達與臨床資料之間的關系。免疫組化結果顯示HIF1Α蛋白主要在細胞核和細胞漿中染色。35例腦膠質(zhì)瘤組織中HIF1Α蛋白的陽性表達率是686％，20例ⅢⅣ腦膠質(zhì)瘤切片中，17853％例表達陽性，3147％例陰性表達。15例ⅠⅡ腦膠質(zhì)瘤切片中，7467％例表達陽性，8533％例陰性表達。HIF1Α蛋白在Ⅱ低級別和ⅢⅣ高級別腦膠質(zhì)瘤表達有差異性P0027。HIF1Α在腦膠質(zhì)瘤中的表達隨著腫瘤級別增高而成上升趨勢P＜005，HIF1Α在腦膠質(zhì)瘤表達與患者年齡，性別、腫瘤大小及發(fā)生部位無關。2KIF2A和HIF1Α蛋白在腦膠質(zhì)瘤組織中表達相關性。免疫組化檢測腦膠質(zhì)瘤中KIF2A和HIF1Α蛋白表達無差異性P033。結論HIF1Α蛋白在高級別腦膠質(zhì)瘤中強表達，在低級別腦膠質(zhì)瘤弱表達。HIF1Α的表達水平與腦膠質(zhì)瘤的病理分級，臨床分期相關。HIF1Α蛋白可作為評價腦膠質(zhì)瘤臨床指標的一個重要因子。KIF2A和HIF1Α蛋白在腦膠質(zhì)瘤的轉(zhuǎn)移過程中均可能化起到正調(diào)控作用，但兩者之間可能不存在相關性，其機制尚待進一步研究明確

簡介：浙江大學醫(yī)學院博士學位論文NNMT過表達對大腸癌細胞生物學行為的影響及意義研究姓名張鈞申請學位級別博士專業(yè)腫瘤學指導教師何超20100408浙江大學博士學位論文中文摘要方法1．通過分子克隆技術構建原核表達質(zhì)粒PGEX．4T2／NNMT和真核表達質(zhì)粒PCDNA3．1／NNMT。2．利用基因工程制備NNMT蛋白，并作為免疫原免疫小鼠制備NNMT單克隆抗體，并建立基于此單克隆抗體的WESTERN．BLOT、免疫組化等實驗方法。3．采用RTPCR和WESTERN．BLOT分析多株結直腸癌細胞系的NNMT表達，篩選NNMT無／低表達和高表達株。4．把PCDNA3．1／NNMT轉(zhuǎn)入COLO320和SW480細胞株，用G418來篩選轉(zhuǎn)入目的基因的細胞，建立相應的NNMT高表達腫瘤細胞模型和空質(zhì)粒PCDNA3．1轉(zhuǎn)染的對照模型。5．通過NNMT高表達腫瘤細胞模型，結合RNA干擾技術，MTT法分析NNMT對腫瘤細胞生長增殖和化療藥物敏感試驗、流式細胞儀分析凋亡和細胞周期、用TRANSWELL細胞遷移實驗和MATRIGEL基質(zhì)浸潤實驗研究NNMT對腫瘤細胞遷移和侵潤等生物學功能的影響。6．用AFFIMETRIXGENEEXPRESSION芯片比較NNMT基因?qū)肭昂蟠竽c癌細胞的基因表達差異，分析NNMT下游效應分子和作用機制。7．采用免疫組化檢測組織NNMT與結直腸癌的臨床病理的關系。結果1．構建了原核表達質(zhì)粒PGEX．4T2／NNMT和真核表達質(zhì)粒PCDNA3．1／NNMT,并通過了酶切和測序驗證。2．50用基因工程制備的NNMT蛋白作為免疫原免疫小鼠制備了能穩(wěn)定分泌抗NNMT單克隆抗體的4個細胞株，該NNMT單克隆抗體具有很好的特異性和反應性，并建立了基于此單克隆抗體的WESTERN．BLOT、免疫組化等實驗方法。3．對多株大腸癌細胞系HT29、SW480、COLO320、SW620、HCTLL6、HCE8693的NNMT的MRNA和蛋白表達進行了分析，RTPCR結果顯示除SW480外，其余細胞均能檢測到MRNA，其中COLO320表達水平最高。WESTERNIII

簡介：本文應用膽總管結扎法建立膽汁淤積性大鼠肝纖維化模型，檢測腎上腺素受體各亞型的表達與肝纖維化發(fā)展的關系；進一步在細胞水平分別給予去甲腎上腺素Α受體及Β受體的阻滯劑，檢測其對HSCS增殖、凋亡以及膠原代謝的作用，并探討交感神經(jīng)遞質(zhì)調(diào)控HSCS生物學行為的信號轉(zhuǎn)導機制，旨在闡明交感神經(jīng)系統(tǒng)在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用及其機制，從而尋求有效的預防和治療肝纖維化的新思路、新策略。實驗內(nèi)容主要包括以下四部分第一部分肝纖維化過程中去甲腎上腺素各受體亞型表達的動態(tài)變化目的研究肝纖維化過程中去甲腎上腺素各受體亞型表達的動態(tài)變化。方法膽總管結扎法建立膽汁淤積性大鼠肝纖維化模型，HE、MASSON染色觀察肝臟病理形態(tài)學變化，免疫組織化學法檢測HSCS活化指標ΑSMA的表達，WESTERNBLOT和REALTIMEQPCR檢測ΑAR、Β1AR、Β2AR蛋白和MRNA的表達。結果①術后大鼠一般情況觀察大鼠膽總管結扎后1H～2H恢復活動，48H左右尿液變黃，3～4天后皮膚毛發(fā)開始轉(zhuǎn)黃，精神逐漸變差，進食量少于對照組，體重增加不明顯或稍有下降。5～6天一般狀況漸差，嗜睡，反應遲緩，活動減少，黃疸明顯，鼠糞呈灰白色。20天后進食量明顯減少，體重與對照組相比明顯降低，并且部分大鼠逐漸出現(xiàn)腹部隆起。②肝組織病理組織學變化模型大鼠肝臟肉眼觀呈褐綠色或棕色，表面略呈細顆粒狀，質(zhì)地變硬。HE及MASSON三色染色顯示，假手術對照組肝小葉結構完整，肝板排列整齊，肝細胞無腫脹，無膽管增生，無淤膽及淋巴細胞浸潤，核仁清晰，少量結締組織局限于門管區(qū)。造模1WK后，模型組肝細胞出現(xiàn)散在變性、壞死及炎細胞浸潤，部分區(qū)域出現(xiàn)小片狀壞死，門管區(qū)小膽管樣上皮細胞增生。造模2WK后，模型組肝板正常排列消失，肝小葉結構紊亂，門管區(qū)小膽管廣泛增生，并向小葉內(nèi)延伸、肝小葉呈花環(huán)狀；新生小膽管周圍纖維組織增生，門管區(qū)面積擴大，肝小葉內(nèi)亦有纖維組織增生。造模3WK～4WK后，模型組肝臟廣泛纖維結締組織增生，增生的纖維間隔互相連接、包繞、分割，改建原來的肝小葉甚至形成假小葉。MASSON三色染色膠原面積密度測定結果顯示模型組1WK、2WK、3WK、4WK膠原面積密度1011％±114％，2114％±122％，2887％±205％，3744％±317％均顯著高于假手術對照組322％±077％，P001。③ΑSMA免疫組織化學染色顯示正常大鼠肝組織中僅在血管壁平滑肌細胞有弱陽性表達；隨著肝纖維化的發(fā)展，大鼠肝組織中ΑSMA陽性細胞明顯增多，主要分布于匯管區(qū)、纖維間隔、肝竇周圍及增生的膽管周圍細胞，造模1WK～4WK大鼠肝組織ΑSMA的陽性面積1058％±175％，2414％±202％，2974％±259％，3428％±201％均顯著高于假手術組412％±151％，P001。即肝纖維化程度越重ΑSMA染色陽性細胞數(shù)量亦越多。④WESTERNBLOT檢測結果顯示，分別在大約57KD、50KD、47KD位置出現(xiàn)ΑAR、Β1AR、Β2AR特異性條帶，在43KD位置可見ΒACTIN條帶。假手術組有少量腎上腺素受體蛋白表達，隨著肝纖維化進展其表達逐漸增加，造模1WK～4WK大鼠肝組織ΑAR、Β1AR、Β2AR蛋白表達量明顯升高154±008，187±015，272±009，284±018VS085±012，P005；157±018，192±011，251±017，289±019VS098±015，P005；184±020，197±009，285±014，387±018VS124±018，P005。⑤REALTIMEQPCR共擴增檢測ΑAR、Β1AR、Β2AR和內(nèi)參照GAPDH基因表達，根據(jù)△CT實驗組CT目的基因CTGAPDH，ACT對照組CT目的基因CTGAPDH，△△CT△CT實驗組△CT對照組，目的基因的相對表達量FOLDS2△△CT計算ΑAR、Β1AR、Β2ARMRNA相對表達量。結果證實，隨著肝纖維化的發(fā)展，ΑAR、Β1AR、Β2ARMRNA表達逐漸上調(diào)，造模4WK表達最多154±008，298±009，323±011，394±013VS100±007，P001；147±010，213±009，254±012，281±010VS100±010，P001；124±O07，278±010，354±014，424±015VS100±008，P001。⑥ΑSMA與ΑAR、Β1AR、Β2AR的多元相關分析顯示，ΑSMA與ΑAR、Β1AR及Β2AR呈正相關，R值分別為0564、0753和0606。結論膽總管結扎法成功建立膽汁淤積性大鼠肝纖維化模型，肝纖維化形成過程中HSCS大量活化、增殖，ΑSMA表達增加。隨著肝纖維化進展，ΑAR、Β1AR、Β2AR蛋白及MRNA含量明顯增加，與ΑSMA呈明顯的正相關。第二部分交感神經(jīng)遞質(zhì)NE對HSCS生物學行為的影響目的探討交感神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素對體外培養(yǎng)的肝星狀細胞增殖、凋亡及膠原代謝的影響。方法體外培養(yǎng)HSCS，用四甲基偶氮唑鹽MTT法檢測NE對HSCS增殖的影響；原位雜交凋亡檢測TUNEL法觀察NE對HSCS凋亡的影響；流式細胞術檢測細胞凋亡率及細胞凋亡調(diào)控基因BCL2和BAX的蛋白表達情況；倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)學變化；用REALTIMEQPCR檢測I型膠原MRNA的表達；并用WESTERNBLOT和REALTIMEQPCR檢測MMP13和TIMP1蛋白和MRNA的表達。結論交感神經(jīng)遞質(zhì)NE對體外活化的HSCS具有促進增殖和抑制凋亡的作用，并引起凋亡調(diào)控基因BAX表達下降，而BCL2表達增加。NE還可以使HSCSMMP13表達降低，TIMP1表達升高，進而降低MMP13TIMP1比值，從而減少其對肝臟膠原降解的作用，使HSCSⅠ型膠原表達量增加，從而加速肝纖維化的進展。第三部分去甲腎上腺素各受體亞型對HSCS生物學行為的調(diào)控作用目的探討交感神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素各受體亞型對肝星狀細胞生物學行為的影響。方法體外培養(yǎng)HSCS，WESTERNBLOT檢測HSCS腎上腺素受體ΑAR、Β1AR及Β2AR蛋白的表達；免疫細胞化學法檢測腎上腺素受體亞型在HSCS的分布與定位；REALTIMEQPCR檢測HSCS腎上腺素受體ΑAR、Β1AR及Β2ARMRNA的表達。細胞干預分為以下6組①空白對照組，為單純HSCS培養(yǎng)；②交感興奮組NE；③ΑAR阻滯組酚妥拉明；④Β1AR阻滯組CGP20712A；⑤Β2AR阻滯組ICI118551；⑥交感抑制組酚妥拉明普萘洛爾。MTT法測定細胞增殖；TUNEL法觀察HSCS凋亡狀況；流式細胞術檢測細胞凋亡率及凋亡調(diào)控基因BAX和BCL2的變化；REALTIMEQPCR檢測Ⅰ型膠原MRNA的表達；并用WESTERNBLOT和REALTIMEQPCR檢測MMP13和TIMP1蛋白和MRNA的表達。結論HSCS可以表達ΑAR、Β1AR和Β2AR腎上腺素受體蛋白和MRNA，主要分布于HSCS的細胞膜和細胞漿。ΑAR、Β1AR和Β2AR特異性阻滯劑均可以抑制HSCS增殖、誘導其凋亡。并可以拮抗NE引起的凋亡基因的變化，使BAX表達下降，BCL2表達升高。其中，ΑAR阻滯劑酚妥拉明和Β2AR阻滯劑ICI118551效果最明顯。NE受體阻滯劑促進HSCSMMP13表達，顯著降低TIMP1表達，MMP13TIMP1比值回升；Ⅰ型膠原MRNA表達亦明顯降低。第四部分NE調(diào)控HSCS生物學行為的信號轉(zhuǎn)導機制目的探討交感神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素對肝星狀細胞生物學行為影響的信號傳導機制。方法體外培養(yǎng)HSCS，加入PI3K信號通路抑制劑LY294002，用四甲基偶氮唑鹽MTT法檢測NE對HSCS增殖的影響；TUNEL法和流式細胞術檢測凋亡情況；WESTERNBLOT檢測PI3K蛋白表達的變化情況。結果①NE促進HSCS增殖，加入PI3K信號通路抑制劑LY294002后細胞增殖受抑制；②NE作用于HSCS24H，TUNEL法和流式細胞術均證實HSCS凋亡率顯著低于對照組，加入PI3K信號通路抑制劑LY294002后HSCS凋亡率升高1440％±451％VS660％±305％BYTUNEL，P＜005；504％±144％VS229％±022％BYFCM，P＜005；③加入PI3K信號通路抑制劑LY294002后，WESTERNBLOT證實PI3K蛋白表達減少。結論交感神經(jīng)遞質(zhì)NE可以促進HSCS增殖，抑制HSCS凋亡，與PI3K信號通路相關。

簡介：點擊查看更多HBV X基因?qū)02肝細胞生物學特性的影響及阿霉素干預HBx調(diào)控L02肝細胞凋亡的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：很多研究表明，骨質(zhì)疏松導致的頜骨骨量減少是口腔種植失敗的重要原因之一，因此，有效的防治骨質(zhì)疏松成為口腔醫(yī)學研究的熱點。全身用藥雖然可以增加頜骨的骨密度，從而提高種植體成功率，但弊端也很大。為此，劉洪臣提出的人工種植牙給藥系統(tǒng)為防治骨質(zhì)疏松和提高種植體成功率提供了很好的途徑。在治療骨質(zhì)疏松藥物中，雌二醇及依普黃酮聯(lián)合應用有望成為理想的治療藥物，所以本實驗通過研究骨質(zhì)疏松患者種植體周圍靶細胞骨質(zhì)疏松頜骨成骨細胞生物學活性的變化和雌二醇及依普黃酮對其的影響，為人工種植牙給藥系統(tǒng)提供一定的實驗研究基礎。第一部分、骨質(zhì)疏松動物模型的建立和頜骨與全身骨質(zhì)疏松的關系。目的建立絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松動物模型，研究頜骨骨質(zhì)疏松與全身的關系。方法采用摘除大鼠雙側(cè)卵巢的方法建立動物骨質(zhì)疏松模型，通過檢測體重、股骨腰椎骨密度、血清指標的方法確定骨質(zhì)疏松模型是否建立。通過檢測頜骨骨密度和組織切片判斷頜骨骨質(zhì)疏松的情況。結果在術后4W時，OVX組的大鼠體重比SHAM組顯著增加，腰椎和股骨出現(xiàn)骨密度下降，血清中鈣出現(xiàn)降低，而堿性磷酸酶和骨鈣素出現(xiàn)了升高。下頜骨在術后4W先出現(xiàn)升高，上頜骨在整個實驗過程中未出現(xiàn)顯著的骨密度變化，但是兩者在術后均呈現(xiàn)了降低的趨勢。HE組織切片顯示下頜骨OVX組骨小梁明顯減少，排列稀疏。結論骨質(zhì)疏松動物模型成功建立，頜骨的變化與全身骨質(zhì)疏松有關。第二部分、去勢后下頜骨成骨細胞增殖分化能力的變化。目的探討大鼠術后4W和12W下頜骨成骨細胞的培養(yǎng)、鑒定及增殖分化礦化能力的變化。方法采用酶消法和組織塊法聯(lián)合培養(yǎng)成骨細胞，用堿性磷酸酶染色、Ⅰ型膠原染色和茜素紅鈣結節(jié)染色鑒定成骨細胞。通過檢測成骨細胞的增殖、堿性磷酸酶、骨鈣素、鈣磷鎂的吸收和鈣結節(jié)比較增殖分化能力的變化。采用RTPCR和WESTERNBLOT的方法檢測PCNA基因蛋白的表達。用透射電鏡觀察成骨細胞微結構的變化。結果所培養(yǎng)細胞堿性磷酸酶、Ⅰ型膠原和茜素紅鈣結節(jié)染色均為陽性。術后4WOVX組成骨細胞增殖能力和堿性磷酸酶活性就出現(xiàn)了明顯的升高；術后12W時OVX組成骨細胞增殖能力、堿性磷酸酶活性、骨鈣素、PCNA基因蛋白的表達均比SHAM組高。透射電鏡的結果顯示12W的OVX組成骨細胞線粒體和異染色質(zhì)明顯增多，而SHAM組溶酶體等黑色顆粒和白色小泡較多。結論大鼠去勢后下頜骨成骨細胞的增殖分化能力出現(xiàn)了明顯增加。第三部分、去勢后下頜骨成骨細胞職和UCP2表達的變化目的探討術后4W和12W下頜骨成骨細胞ER和UCP2的表達。方法采用RTPCR和WESTERNBLOT檢測ER和UCP2的表達變化。結果成骨細胞表達了UCP2，且OVX組表達的UCP2比SHAM組明顯減少。ER在OVX組的基因表達高于SHAM組。結論成骨細胞ER和UCP2表達的改變可能與骨質(zhì)疏松增殖分化能力變化的機制有關。第四部分、依普黃酮及雌二醇對骨質(zhì)疏松成骨細胞生物學活性的影響。目的探討雌二醇及依普黃酮聯(lián)合作用對骨質(zhì)疏松性成骨細胞增殖分化的影響和相關基因蛋白的表達。方法檢測不同藥物濃度對于骨質(zhì)疏松成骨細胞的增殖能力和堿性磷酸酶的影響，確定最大促進作用的藥物濃度，用RTPCR和WESTERNBLOT方法檢測藥物對于UCP2、PCNA和ER表達的影響。結果所選濃度的雌二醇和依普黃酮均可以增加骨質(zhì)疏松性成骨細胞的增殖分化能力，未見抑制現(xiàn)象。并且兩種藥物均促進UCP2和PCNA的表達，但聯(lián)合用藥時表達并沒有相互加強。依普黃酮抑制ERΑ表達，促進ERΒ表達，兩者聯(lián)合應用對ER的表達無明顯作用。結論所選濃度的雌二醇及依普黃酮均起到促進骨質(zhì)疏松成骨細胞增殖分化的作用，未見抑制作用。并且藥物對PCNA、UCP2和ER的表達也有影響，兩藥之間具體的作用機制并不清楚。

簡介：上海交通大學博士學位論文RHOA在胃癌細胞生物學行為和氧化應激促進凋亡中的作用姓名蔡軍申請學位級別博士專業(yè)細胞生物學指導教師易靜20070501上海交通大學醫(yī)學院博士學位論文2NFKB的激活在胃癌SGC7901細胞發(fā)揮促生存抗凋亡的作用；活化RHOA促進NFKB與DNA的特異結合，加強NFKB的促轉(zhuǎn)錄活性，ROCK抑制劑Y27632部分逆轉(zhuǎn)這一作用。砷劑聯(lián)用大黃素引起的氧化應激抑制NFKB與DNA的特異結合，阻止NFKB促進下游基因的表達。3活化的RHOA通過對ACTIN的裝配和VINCULIN的分布的影響，使細胞具有抗ANOIKIS的作用，砷劑聯(lián)用大黃素作用后，抑制了RHOA的活性，引起細胞黏附復合體的崩解，使腫瘤細胞形態(tài)改變，黏附減弱，凋亡明顯增加。結論RHOA促進胃癌細胞增殖，具有抗凋亡作用，其機制通過促進NFKB的激活和抗ANOIKIS的作用，活化RHOA促進黏附斑復合體的穩(wěn)定性。其中，促進NFKB的激活途徑部分依賴于RHOA下游效應分子ROCK。砷劑聯(lián)用大黃素引起氧化應激促進胃癌細胞凋亡，其作用機制涉及對細胞內(nèi)活性RHOA的抑制，繼而引起細胞黏附斑復合體的崩解。關鍵詞RHOA，氧化應激，ANOIKIS，NFKB，胃癌細胞

簡介：MIR一520B對膀胱癌細胞生物學行為的影響及其分子機制研究論文作者簽指導教師簽名論文評閱人1評閱人2評閱人3評閱人4評閱人5匿名評閱匿名評閱匿名評閱匿名評閱答辯委員會主席陵昭典教援逝江太堂醫(yī)堂院附屬箍二醫(yī)院蠆員1昌伯壅教援逝塹生醫(yī)藥太堂附屬箍三醫(yī)院委員2杜佳堊主任醫(yī)婭浙江太堂醫(yī)堂隨附屬筮三醫(yī)院委員3撻耋送主任醫(yī)匝蟲國厶民鯉趑至箍二二土醫(yī)院委員4選拍垡主任醫(yī)婭逝江太堂匡堂院附屬箍二醫(yī)院委員5汪朔主任醫(yī)埡浙、江太堂醫(yī)堂院附屬箍二醫(yī)院委員6金曉丕主任醫(yī)婭逝江太堂醫(yī)堂院隘屬箍二醫(yī)院答辯日期2014年11月27日HOSPITAL，COLLEGEOFMEDICAL，ZHEJIANGUNIVERSITYCOMMITTEEMAN5WANGSHUOCHIEFCONSULTANTTHEFIRSTAFFILIATEDHOSPITAL，COLLEGEOFMEDICAL，ZHANGUNIVERSITYCOMMITTEEMAN6JINXIAODONGCHIEFCONSULTANTTHEFIRSTAFFILIATEDHOSPITAL，COLLEGEOFMEDICAL，ZHANGUNIVERSITYDATEOFORALDEFENCE27NOV2014

簡介：天津醫(yī)科大學博士學位論文ARF缺失與腫瘤細胞MDMX異常調(diào)控的分子生物學機制姓名李小龍申請學位級別博士專業(yè)臨床醫(yī)學；腫瘤學指導教師郝希山201205天津醫(yī)科大學博士學位論文ABSTRACTMDMXISAHETERODIMERICPARTNEROFMDM2ANDACRITICALREGULATOROFP53THEMDMXLEVELISGENERALLYELEVATEDINTUMORSWITHWILDTYPEP53ANDCONTRIBUTESTOP53INACTIVATIONMDMDDEGRADATIONISCONTROLLEDINPARTBVMDM2MEDIATEDUBIQUITINATIONHEREWESHOWTHATⅣIDⅣⅨTURNOVERISHIGHLYRESPONSIVETOCHANGESINMDM2LEVELINNONTRANSFORMEDCELLSBUTNOTINTMNORCELLSWEFOUNDTHAT10SSOFALTEMATEREADINGFRAMEARFEXPRESSION，WHICHOCCURSINMOSTTUMORS謝THWILDTYPEP53SIGNIFICANTLYREDUCESMDMXSENSITIVITYTOMDM2RESTORATIONOFAI江EXPRESSIONINTUMORCELLSENABLESMDM2TODEGRADEMDMXINADOSEDEPENDENTMANNERARFBINDSTOMDⅣ【2ANDSTIMULATESASECONDSITEINTERACTIONBETWEENTHECENTRALREGIONOFMDM2ANDMDMXANDTHUSINCREASESMDMX_】ⅥDM2BINDINGANDMDMXUBIQUITINATIONTHESERESULTSREVEALANIMPORTANTABNORMALITYINTHEP53REGULATORYPATHWAYASACONSEQUENCEOFAI邛DEFICIENCYLOSSOFARFDURINGTUMORDEVELOPMENTNOTONLYPREVENTSP53STABILIZATIONBYPROLIFERATIVESTRESSBUTALSOCAUSESACCUMULATIONOFMDⅣTHATCOMPROMISESP53ACTIVITYTHISPHENOMENONMAYREDUCETHECLINICALEFFICACYOFMDM2一SPECIFICINHIBITORSBYPREVENTINGMDMXDOWNREGULATIONKEYWORDSMDM2MDMXARFP53UBIQUITINATIONNUTLINII

簡介：本文聚焦空間結構對成纖維細胞的生物學行為的影響，探討真皮替代物減少瘢痕形成的機制。方法取清潔級SD大鼠30只，把松質(zhì)骨和密質(zhì)骨植入大鼠背部皮下和肉膜層之間，進行HE染色，同時檢測ΑSMA的表達，動態(tài)觀察有無三維結構和三維結構是否均勻?qū)Τ衫w維細胞的影響。另外9只大鼠將整塊絲素膜和絲素膜碎片，分別植入背部皮下和肉膜層之間，進行HE染色，檢測ΑSMA的表達，觀察三維結構的完整性和連續(xù)性對成纖維細胞的影響；其余12只大鼠在背部皮下和肉膜層之間，觀察術后1周、2周和3周成纖維細胞形態(tài)學改變，同時檢測ΑSMA、BFGF、PCNA的表達及細胞凋亡，觀察不同三維結構對成纖維細胞生物學行為的影響。在體外實驗中，把來源于人包皮的成纖維細胞接種至孔徑分別為200UM和1000UM的膠原膜內(nèi)，于1周和2周取材，進行動態(tài)組織學觀察。結論1空間形態(tài)結構的存在能夠影響成纖維細胞的形態(tài)及其功能；2完整、連續(xù)和均勻的空間形態(tài)結構有利于調(diào)控成纖維細胞生物學行為，從而減少瘢痕的形成；3太小和太大的空間形態(tài)結構都不利于成纖維細胞生物學行為的正常調(diào)控，只有比較適合成纖維細胞的空間形態(tài)結構，才能使其生物學行為沿著有利于減少瘢痕增生的方向發(fā)展；4在創(chuàng)面愈合過程中，通過完整的空間形態(tài)結構來影響成纖維細胞的生物學行為，可能是真皮模板抑制瘢痕形成、改善愈合質(zhì)量的機制之一。